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KYSE-410
Tessuto
Esofago
Malattia
Carcinoma a cellule squamose dell'esofago
Sinonimi
KYSE 410, KYSE410, Kyse410, KYSE0410

Documenti

KYSE-410

Cell line · Codice prodotto 305122

KYSE-410 is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line that was established from a primary tumor resected from an adult patient. This cel...

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01Informazioni generali

Descrizione

KYSE-410 è una linea cellulare di carcinoma esofageo umano a cellule squamose (ESCC) ottenuta da un tumore primario resecato da un paziente adulto. Questa linea cellulare fa parte della serie KYSE, che comprende diversi modelli di ESCC progettati per fornire uno strumento completo per lo studio dei vari aspetti del cancro esofageo. Le cellule KYSE-410 hanno un tempo di raddoppiamento di 24,2 ore, che riflette una moderata capacità proliferativa. Crescono come monostrati aderenti, una caratteristica comune tra le cellule tumorali di derivazione epiteliale, e presentano una morfologia relativamente uniforme al microscopio a contrasto di fase.

A livello genetico, KYSE-410 si distingue soprattutto per le sue alterazioni epigenetiche. Il gene p16 (INK4a) in KYSE-410 mostra un'ipermetilazione delle isole CpG in 5', una modifica che porta al silenziamento di questo cruciale gene soppressore del tumore. Questa modifica epigenetica è un importante fattore di oncogenesi in molti tumori, tra cui l'ESCC, in quanto determina la perdita della regolazione del ciclo cellulare e una proliferazione cellulare incontrollata. Ciononostante, KYSE-410 mantiene una configurazione wild-type per il gene p15 (INK4b), evidenziando un'inattivazione selettiva di p16 tipica di alcuni sottotipi di cancro.

La linea cellulare KYSE-410 è tumorigenica, come dimostrato dalla sua capacità di indurre la formazione di tumori quando viene impiantata in topi nudi atimici. L'analisi istologica di questi tumori mostra caratteristiche coerenti con il carcinoma a cellule squamose, rendendo KYSE-410 un modello rilevante per gli studi in vivo. Questa linea cellulare è molto preziosa per la ricerca incentrata sulla comprensione del ruolo delle modificazioni epigenetiche nella progressione del cancro e per testare l'efficacia delle terapie che hanno come bersaglio i regolatori epigenetici, sebbene non sia destinata ad applicazioni terapeutiche o in vivo.

Tessuto
Esofago
Malattia
Carcinoma a cellule squamose dell'esofago
Sinonimi
  • KYSE 410
  • KYSE410
  • Kyse410
  • KYSE0410

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tempo di raddoppio
da 32 a 45 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
KYSE-410 (numero di catalogo Cytion 305122)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1352

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1-3*10^4/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
51 anni
Etnia
Asiatico