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KYSE-150
Tessuto
Esofago
Malattia
Carcinoma a cellule squamose dell'esofago
Sinonimi
KYSE 150, KYSE150, Kyse150, KY150

Documenti

KYSE-150

Cell line · Codice prodotto 305087

The KYSE-150 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor resected from an adult patient. This cell l...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare KYSE-150 è un modello di carcinoma esofageo a cellule squamose (ESCC) umano derivato da un tumore primario resecato da un paziente adulto. Questa linea cellulare fa parte della serie KYSE, sviluppata per fornire un modello affidabile in vitro per lo studio della patobiologia del cancro esofageo, in particolare per la comprensione della tumorigenesi e della risposta terapeutica. Le cellule KYSE-150 presentano un rapido tempo di raddoppiamento di 13,7 ore, che indica un'elevata capacità proliferativa, caratteristica dei fenotipi tumorali aggressivi. Queste cellule crescono in coltura monostrato, aderendo al substrato e formando un foglio uniforme, tipico delle cellule tumorali di derivazione epiteliale.

L'analisi genetica di KYSE-150 rivela alterazioni significative in geni soppressori tumorali chiave, in particolare nel gene p16 (INK4a). Questa linea cellulare presenta aberrazioni nel gene p16, in particolare sotto forma di metilazione delle isole CpG, che silenzia il gene e contribuisce alla perdita della regolazione del ciclo cellulare. Questa modificazione epigenetica è un meccanismo comune a molti tumori e sottolinea la rilevanza di KYSE-150 per lo studio del silenziamento genico e del suo ruolo nella progressione del cancro. Inoltre, la linea cellulare mantiene la configurazione wild-type del gene p15, suggerendo un meccanismo di inattivazione selettiva per p16 rispetto a p15 in questo modello, che può essere di interesse per gli studi di genomica comparativa.

Il KYSE-150 è prezioso non solo per studiare i meccanismi molecolari e cellulari dell'ESCC, ma anche per esplorare gli effetti delle alterazioni genetiche ed epigenetiche nel cancro. Rappresenta un modello robusto per lo studio di interventi terapeutici mirati alle vie specifiche disregolate nel carcinoma esofageo a cellule squamose. Dato l'alto tasso di proliferazione e il profilo genetico specifico, KYSE-150 è un candidato adatto per test farmacologici in vitro e altre applicazioni legate alla ricerca sul cancro, ma non per scopi terapeutici o in vivo.

Tessuto
Esofago
Malattia
Carcinoma a cellule squamose dell'esofago
Sinonimi
  • KYSE 150
  • KYSE150
  • Kyse150
  • KY150

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tempo di raddoppio
25 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
KYSE-150 (numero di catalogo Cytion 305087)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1348

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Miscelare Ham's F12 e RPMI 1640 in un rapporto 50:50 (articolo Cytion numero 820600a e 820702a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 5% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
49 anni
Etnia
Asiatico