Pereiti prie turinio
KYSE-150
Audinys
Stemplė
Liga
Stemplės plokščialąstelinė karcinoma
Sinonimai
KYSE 150, KYSE150, Kyse150, KY150

Dokumentai

KYSE-150

Cell line · Prekės numeris 305087

The KYSE-150 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor resected from an adult patient. This cell l...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

KYSE-150 ląstelių linija yra žmogaus stemplės plokščialąstelinės karcinomos (ESCC) modelis, gautas iš pirminio naviko, pašalinto iš suaugusio paciento. Ši ląstelių linija priklauso KYSE serijai, kuri buvo sukurta siekiant sukurti patikimą in vitro modelį stemplės vėžio patobiologijai tirti, ypač siekiant suprasti naviko genezę ir atsaką į gydymą. KYSE-150 ląstelės pasižymi greitu padvigubėjimo laiku - 13,7 valandos, o tai rodo didelį proliferacinį pajėgumą, kuris būdingas agresyviems vėžio fenotipams. Šios ląstelės auga viensluoksnėje kultūroje, prilimpa prie substrato ir sudaro vientisą lakštą, kuris būdingas epitelinėms vėžio ląstelėms.

Genetinė KYSE-150 analizė atskleidžia reikšmingus pagrindinių naviką slopinančių genų, ypač p16 (INK4a) geno, pokyčius. Šioje ląstelių linijoje pastebimos p16 geno aberacijos, ypač CpG salų metilinimas, dėl kurio genas nutyla ir prarandamas ląstelių ciklo reguliavimas. Ši epigenetinė modifikacija yra dažnas daugelio vėžinių susirgimų mechanizmas ir pabrėžia KYSE-150 svarbą tiriant genų slopinimą ir jo vaidmenį vėžio progresavimui. Be to, šioje ląstelių linijoje išlieka laukinio tipo p15 geno konfigūracija, o tai rodo, kad šiame modelyje p16 inaktyvavimo mechanizmas yra selektyvus, o ne p15, o tai gali būti įdomu atliekant lyginamuosius genominius tyrimus.

KYSE-150 yra vertinga ne tik tiriant molekulinius ir ląstelinius ESCC mechanizmus, bet ir tiriant genetinių ir epigenetinių pokyčių poveikį vėžiui. Tai patikimas modelis, leidžiantis tirti terapines intervencijas, nukreiptas į specifinius stemplės plokščialąstelinės karcinomos pažeistus kelius. Atsižvelgiant į didelį proliferacijos greitį ir specifinį genetinį profilį, KYSE-150 yra tinkamas kandidatas in vitro farmakologiniams tyrimams ir kitoms su vėžio tyrimais susijusioms reikmėms, bet ne terapiniams ar in vivo tikslams.

Audinys
Stemplė
Liga
Stemplės plokščialąstelinė karcinoma
Sinonimai
  • KYSE 150
  • KYSE150
  • Kyse150
  • KY150

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
25 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
KYSE-150 (Cytion katalogo numeris 305087)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1348

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Sumaišykite Ham's F12 ir RPMI 1640 santykiu 50:50 (Cytion straipsnių numeriai 820600a ir 820702a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 5 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
49 metai
Etninė priklausomybė
Azijos