Przejdź do treści
KYSE-150
Chusteczka
Przełyk
Choroba
Rak płaskonabłonkowy przełyku
Synonimy
KYSE 150, KYSE150, Kyse150, KY150

Dokumenty

KYSE-150

Cell line · Numer produktu 305087

The KYSE-150 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor resected from an adult patient. This cell l...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa KYSE-150 to model ludzkiego raka płaskonabłonkowego przełyku (ESCC) pochodzący z guza pierwotnego wyciętego od dorosłego pacjenta. Ta linia komórkowa jest częścią serii KYSE, która została opracowana w celu zapewnienia niezawodnego modelu in vitro do badania patobiologii raka przełyku, w szczególności w celu zrozumienia nowotworzenia i odpowiedzi terapeutycznej. Komórki KYSE-150 wykazują szybki czas podwojenia wynoszący 13,7 godziny, co wskazuje na wysoką zdolność proliferacyjną, która jest charakterystyczna dla agresywnych fenotypów raka. Komórki te rosną w hodowli jednowarstwowej, przylegając do podłoża i tworząc jednolity arkusz, co jest typowe dla komórek nowotworowych pochodzenia nabłonkowego.

Analiza genetyczna KYSE-150 ujawnia znaczące zmiany w kluczowych genach supresorowych nowotworów, w szczególności w genie p16 (INK4a). Ta linia komórkowa wykazuje aberracje w genie p16, szczególnie w postaci metylacji wysp CpG, która wycisza gen i przyczynia się do utraty regulacji cyklu komórkowego. Ta epigenetyczna modyfikacja jest powszechnym mechanizmem w wielu nowotworach i podkreśla znaczenie KYSE-150 w badaniu wyciszania genów i jego roli w progresji raka. Co więcej, linia komórkowa zachowuje dziką konfigurację genu p15, co sugeruje selektywny mechanizm inaktywacji p16 w stosunku do p15 w tym modelu, co może być interesujące w porównawczych badaniach genomicznych.

KYSE-150 jest nie tylko cenny do badania molekularnych i komórkowych mechanizmów ESCC, ale także do badania skutków zmian genetycznych i epigenetycznych w raku. Stanowi on solidny model do badania interwencji terapeutycznych ukierunkowanych na określone szlaki rozregulowane w raku płaskonabłonkowym przełyku. Biorąc pod uwagę wysoki wskaźnik proliferacji i specyficzny profil genetyczny, KYSE-150 jest odpowiednim kandydatem do testów farmakologicznych in vitro i innych zastosowań związanych z badaniami nad rakiem, ale nie do celów terapeutycznych lub in vivo.

Chusteczka
Przełyk
Choroba
Rak płaskonabłonkowy przełyku
Synonimy
  • KYSE 150
  • KYSE150
  • Kyse150
  • KY150

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek
Czas podwojenia
25 godzin

04Identyfikatory

Źródło
KYSE-150 (numer katalogowy Cytion 305087)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1348

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Należy zmieszać F12 Ham'a i RPMI 1640 w stosunku 50:50 (numery artykułów Cytion 820600a i 820702a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 5% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
49 lat
Pochodzenie etniczne
Azjatycki