Prejsť na obsah
KYSE-150
Tkanivo
Pažerák
Choroba
Skvamocelulárny karcinóm pažeráka
Synonymá
KYSE 150, KYSE150, Kyse150, KY150

Dokumenty

KYSE-150

Cell line · Číslo výrobku 305087

The KYSE-150 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor resected from an adult patient. This cell l...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia KYSE-150 je model ľudského skvamocelulárneho karcinómu pažeráka (ESCC) odvodený z primárneho nádoru resekovaného dospelému pacientovi. Táto bunková línia je súčasťou série KYSE, ktorá bola vyvinutá s cieľom poskytnúť spoľahlivý in vitro model na štúdium patobiológie rakoviny pažeráka, najmä na pochopenie tumorigenézy a terapeutickej odpovede. Bunky KYSE-150 vykazujú rýchly zdvojovací čas 13,7 hodiny, čo poukazuje na vysokú proliferačnú schopnosť, ktorá je charakteristická pre agresívne fenotypy rakoviny. Tieto bunky rastú v jednovrstvovej kultúre, priliehajú k substrátu a vytvárajú rovnomerný povlak, ktorý je typický pre epitelové rakovinové bunky.

Genetická analýza KYSE-150 odhaľuje významné zmeny v kľúčových nádorových supresorových génoch, najmä v géne p16 (INK4a). Táto bunková línia vykazuje aberácie v géne p16, konkrétne vo forme metylácie ostrovov CpG, ktorá umlčuje gén a prispieva k strate regulácie bunkového cyklu. Táto epigenetická modifikácia je bežným mechanizmom v mnohých prípadoch rakoviny a zdôrazňuje význam KYSE-150 pre štúdium umlčovania génov a jeho úlohy pri progresii rakoviny. Okrem toho si táto bunková línia zachováva konfiguráciu génu p15 divokého typu, čo naznačuje mechanizmus selektívnej inaktivácie p16 oproti p15 v tomto modeli, ktorý môže byť zaujímavý pre porovnávacie genomické štúdie.

KYSE-150 je cenná nielen na štúdium molekulárnych a bunkových mechanizmov ESCC, ale aj na skúmanie účinkov genetických a epigenetických zmien pri rakovine. Poskytuje robustný model na skúmanie terapeutických zásahov zameraných na špecifické dráhy dysregulované pri skvamóznom karcinóme pažeráka. Vzhľadom na vysokú mieru proliferácie a špecifický genetický profil je KYSE-150 vhodným kandidátom na farmakologické testovanie in vitro a iné aplikácie súvisiace s výskumom rakoviny, nie však na terapeutické účely alebo in vivo.

Tkanivo
Pažerák
Choroba
Skvamocelulárny karcinóm pažeráka
Synonymá
  • KYSE 150
  • KYSE150
  • Kyse150
  • KY150

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové
Doba zdvojnásobenia
25 hodín

04Identifikátory

Citácia
KYSE-150 (katalógové číslo Cytion 305087)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1348

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Zmiešajte Ham's F12 a RPMI 1640 v pomere 50:50 (čísla článkov Cytion 820600a a 820702a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 5 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
49 rokov
Etnická príslušnosť
Ázijské