Prejsť na obsah
KYSE520
Tkanivo
Pažerák
Choroba
Spinocelulárny karcinóm
Synonymá
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Dokumenty

KYSE520

Cell line · Číslo výrobku 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia KYSE520 je model ľudského skvamózneho karcinómu pažeráka (ESCC) odvodený z primárneho nádoru. Je stredne diferencovaná a bola užitočná pri skúmaní epitelovo-mezenchymálnej plasticity (EMP) pri rakovine pažeráka. Bunky KYSE520 vykazujú heterogenitu a pozostávajú z epiteliálnych (CD44v+) aj mezenchymálnych (CD44v-) subpopulácií. Tieto dve populácie sú schopné vzájomnej konverzie, čo odráža dynamický proces EMP. Vďaka tejto vlastnosti je KYSE520 vynikajúcim modelom na štúdium vlastností nádorových kmeňových buniek a mechanizmov chemorezistencie v ESCC.

Z genetického hľadiska vykazujú bunky KYSE520 pozoruhodnú epigenetickú reguláciu. Promótorová oblasť génu JAM3, nádorového supresora, je v týchto bunkách nemetylovaná, čo umožňuje jeho expresiu. JAM3 zohráva úlohu pri regulácii bunkovej proliferácie, migrácie a invázie prostredníctvom signalizácie Wnt/β-katenínu. Zachovanie expresie JAM3 v KYSE520 sa spája s potlačením agresívnych fenotypov rakoviny.

V terapeutickom výskume sa bunky KYSE520 použili na skúmanie úlohy receptora podobného fibroblastovému rastovému faktoru 1 (FGFRL1). Štúdie ukázali, že bunky KYSE520 s deficitom FGFRL1 vykazujú znížený rast a pohyblivosť nádorov spolu s poklesom expresie matrixovej metaloproteinázy-1 (MMP-1) a proteínu viažuceho fibroblastový rastový faktor 1 (FGFBP1). Tieto zistenia zdôrazňujú význam FGFRL1 v nádorovom bujnení a naznačujú potenciálne terapeutické ciele. Okrem toho dynamika EMP a súvisiace molekulárne dráhy v bunkách KYSE520 poskytujú pohľad na progresiu ESCC a mechanizmy rezistencie, čo prispieva k vývoju cielenej liečby.

Tkanivo
Pažerák
Choroba
Spinocelulárny karcinóm
Synonymá
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citácia
KYSE520 (katalógové číslo Cytion 305449)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Prejav a náchylnosť

Onkogény
TP53, MYC
Mutčný profil
Mutácia: TP53, c.376-2A>T, akceptorová mutácia

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilný glutamín, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 1,1 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820600a) + RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a); zmes 1:1
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 2% FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
0,6 – 1,2 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
58 rokov
Etnická príslušnosť
Japonský