الانتقال إلى المحتوى
KYSE520
الأنسجة
المريء
المرض
سرطان الخلايا الحرشفية
المرادفات
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

المستندات

KYSE520

Cell line · رقم المنتج 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

إن خط الخلايا KYSE520 هو نموذج لسرطان الخلايا الحرشفية المريئية البشري (ESCC) مشتق من ورم أولي. وهو متمايز بشكل معتدل وكان له دور فعال في دراسة اللدونة الظهارية-المتوسطة اللدونة (EMP) في سرطان المريء. تُظهر خلايا KYSE520 عدم التجانس، حيث تتكون من مجموعات سكانية فرعية شبيهة بالظهارة (CD44v+) وشبيهة باللحمة المتوسطة (CD44v-). هاتان المجموعتان السكانيتان قادرتان على التحول البيني، مما يعكس عملية ديناميكية في الخلايا الظهارية. وتجعل هذه الخاصية من KYSE520 نموذجاً ممتازاً لدراسة سمات الخلايا الجذعية السرطانية وآليات المقاومة الكيميائية في سرطان الخلايا الجذعية السرطانية ESCC.

من الناحية الوراثية، تُظهر خلايا KYSE520 تنظيماً لاجينيًا ملحوظًا. فمنطقة المروج لجين JAM3، وهو مثبط للورم، غير مثيلة في هذه الخلايا، مما يسمح بالتعبير عنه. يلعب JAM3 دورًا في تنظيم تكاثر الخلايا والهجرة والغزو من خلال إشارات Wnt/β-catenin. وقد تم ربط الحفاظ على تعبير JAM3 في KYSE520 بقمع الأنماط الظاهرية السرطانية العدوانية.

في الأبحاث العلاجية، استُخدمت خلايا KYSE520 لاستكشاف دور مستقبلات عامل نمو الأرومة الليفية الشبيهة بعامل النمو الليفي 1 (FGFRL1). وقد أظهرت الدراسات أن خلايا KYSE520 التي تعاني من نقص في مستقبلات عامل النمو الشبيه بعامل النمو الليفي 1 (FGFRL1) تُظهر انخفاضًا في نمو الورم وحركته، إلى جانب انخفاض في تعبير بروتين عامل نمو الأرومة الليفية 1 (FGFBP1). تؤكد هذه النتائج على أهمية بروتين FGFRL1 في تكوين الورم وتقترح أهدافًا علاجية محتملة. وبالإضافة إلى ذلك، توفر ديناميكيات بروتين EMP والمسارات الجزيئية المرتبطة به في خلايا KYSE520 رؤى حول تطور الورم السرطاني الكيسي وآليات مقاومته، مما يساهم في تطوير علاجات مستهدفة.

الأنسجة
المريء
المرض
سرطان الخلايا الحرشفية
المرادفات
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة

04المعرّفات

المرجع
KYSE520 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 305449)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1355

05التعبير والقابلية للإصابة

الجينات المسرطنة
TP53، MYC
الأنماط الطفريّة
طفرة: TP53، c.376-2A>T، طفرة متقبلة للوصلة

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
هامز إف 12، ث: 1.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 1.0 مللي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.1 جم/لتر صوديوم هيدروكسيد الصوديوم (رقم المادة 820600أ) + RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر صوديوم هيدروكسيد الصوديوم (رقم المادة 820700أ) ؛ خليط 1:1
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
دعم الوسط ب 2٪ FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
0.6 - 1.2 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
58 سنة
الأصل العرقي
ياباني