Preskoči na vsebino
KYSE520
Tkivo
Ezofagus
Bolezen
Ploščatocelični karcinom
Sinonimi
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Dokumenti

KYSE520

Cell line · Številka izdelka 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija KYSE520 je model človeškega ploščatoceličnega karcinoma požiralnika (ESCC), ki izhaja iz primarnega tumorja. Je zmerno diferencirana in je bila uporabna pri raziskovanju epitelijsko-mezenhimske plastičnosti (EMP) pri raku požiralnika. Celice KYSE520 so heterogene, sestavljene iz epitelijskih (CD44v+) in mezenhimskih (CD44v-) subpopulacij. Ti dve populaciji se lahko med seboj spreminjata, kar kaže na dinamičen proces EMP. Zaradi te lastnosti je KYSE520 odličen model za preučevanje lastnosti rakavih matičnih celic in mehanizmov kemorezistence pri ESCC.

Genetsko so celice KYSE520 izrazito epigenetsko urejene. Promotorsko območje gena JAM3, tumorskega supresorja, je v teh celicah nemetilirano, kar omogoča njegovo izražanje. JAM3 ima vlogo pri uravnavanju proliferacije, migracije in invazije celic prek signalizacije Wnt/β-katenina. Ohranjanje izražanja JAM3 v KYSE520 je povezano z zaviranjem agresivnih fenotipov raka.

V terapevtskih raziskavah so bile celice KYSE520 uporabljene za raziskovanje vloge receptorju za fibroblastni rastni dejavnik podobnega 1 (FGFRL1). Študije so pokazale, da imajo celice KYSE520 s pomanjkanjem FGFRL1 zmanjšano rast in gibljivost tumorjev, poleg tega pa se zmanjša izražanje matrične metaloproteinaze-1 (MMP-1) in proteina 1, ki veže fibroblastni rastni faktor (FGFBP1). Te ugotovitve poudarjajo pomen FGFRL1 v tumorigenezi in nakazujejo možne terapevtske cilje. Poleg tega dinamika EMP in z njo povezane molekularne poti v celicah KYSE520 omogočajo vpogled v napredovanje ESCC in mehanizme odpornosti, kar prispeva k razvoju ciljnih načinov zdravljenja.

Tkivo
Ezofagus
Bolezen
Ploščatocelični karcinom
Sinonimi
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni

04Identifikatorji

Navajanje vira
KYSE520 (kataloška številka Cytion 305449)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Izražanje in dovzetnost

Onkogeni
TP53, MYC
Profil mutacij
Mutacija: C.376-2A>T, mutacija sprejemnika splice

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilnega glutamina, w: 1,0 mM natrijevega piruvata, w: 1,1 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820600a) + RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a); zmes 1:1
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 2 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
0,6–1,2 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
58 let
Etnična pripadnost
Japonski