İçeriğe atla
KYSE520
Doku
Özofagus
Hastalık
Skuamöz hücreli karsinom
Eş anlamlılar
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

KYSE520

Cell line · Ürün numarası 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

KYSE520 hücre hattı, bir primer tümörden türetilen bir insan özofagus skuamöz hücreli karsinom (ESCC) modelidir. Orta derecede farklılaşmıştır ve özofagus kanserinde epitelyal-mezenkimal plastisitenin (EMP) araştırılmasında etkili olmuştur. KYSE520 hücreleri hem epitel benzeri (CD44v+) hem de mezenkimal benzeri (CD44v-) alt popülasyonlardan oluşan heterojenite sergiler. Bu iki popülasyon, dinamik bir EMP sürecini yansıtacak şekilde birbirlerine dönüşebilmektedir. Bu özellik KYSE520'yi ESCC'de kanser kök hücre özelliklerini ve kemorezistans mekanizmalarını incelemek için mükemmel bir model haline getirmektedir.

Genetik olarak, KYSE520 hücreleri dikkate değer epigenetik düzenleme sergilemektedir. Bir tümör baskılayıcı olan JAM3 geninin promotör bölgesi bu hücrelerde metillenmemiş olup ekspresyonuna izin verir. JAM3, Wnt/β-katenin sinyalizasyonu yoluyla hücre çoğalması, göçü ve istilasının düzenlenmesinde rol oynar. KYSE520'de JAM3 ifadesinin korunması agresif kanser fenotiplerinin baskılanmasıyla ilişkilendirilmiştir.

Terapötik araştırmalarda, KYSE520 hücreleri fibroblast büyüme faktörü reseptörü benzeri 1'in (FGFRL1) rolünü araştırmak için kullanılmıştır. Çalışmalar, FGFRL1 eksikliği olan KYSE520 hücrelerinin matris metaloproteinaz-1 (MMP-1) ve fibroblast büyüme faktörü bağlayıcı protein 1 (FGFBP1) ekspresyonunda azalmanın yanı sıra tümör büyümesi ve hareketliliğinde azalma sergilediğini göstermiştir. Bu bulgular FGFRL1'in tümörigenezdeki öneminin altını çizmekte ve potansiyel terapötik hedefler önermektedir. Ayrıca, KYSE520 hücrelerindeki EMP dinamikleri ve ilişkili moleküler yolaklar, ESCC ilerlemesi ve direnç mekanizmaları hakkında içgörü sağlayarak hedefe yönelik tedavilerin geliştirilmesine katkıda bulunur.

Doku
Özofagus
Hastalık
Skuamöz hücreli karsinom
Eş anlamlılar
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
KYSE520 (Cytion katalog numarası 305449)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05İfade ve duyarlılık

Onkogenler
TP53, MYC
Mutasyon profili
Mutasyon: TP53, c.376-2A>T, Splice alıcı mutasyonu

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Ham's F12, w: 1.0 mM stabil Glutamin, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 1.1 g/L NaHCO3 (Cytion ürün numarası 820600a) + RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion ürün numarası 820700a); 1:1 karışım
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %2 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
0,6 - 1,2 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
58 yıl
Etnik köken
Japonca