Gå til innholdet
KYSE520
Vev
Øsofagus
Sykdom
Plateepitelkarsinom
Synonymer
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Dokumenter

KYSE520

Cell line · Produktnummer 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

KYSE520-cellelinjen er en human esophageal plateepitelkarsinom (ESCC) avledet fra en primærsvulst. Den er moderat differensiert og har vært viktig for å undersøke epitelial-mesenkymal plastisitet (EMP) i spiserørskreft. KYSE520-celler er heterogene og består av både epitel-lignende (CD44v+) og mesenkym-lignende (CD44v-) subpopulasjoner. Disse to populasjonene kan omdannes til hverandre, noe som gjenspeiler en dynamisk EMP-prosess. Denne egenskapen gjør KYSE520 til en utmerket modell for å studere kreftstamcelleegenskaper og kjemoresistensmekanismer i ESCC.

Genetisk sett viser KYSE520-cellene en bemerkelsesverdig epigenetisk regulering. Promotorregionen til JAM3-genet, en tumorsuppressor, er umetylert i disse cellene, noe som gjør det mulig å uttrykke det. JAM3 spiller en rolle i reguleringen av celleproliferasjon, migrasjon og invasjon gjennom Wnt/β-catenin-signalering. Opprettholdelsen av JAM3-uttrykk i KYSE520 har blitt knyttet til undertrykkelse av aggressive kreftfenotyper.

I terapeutisk forskning har KYSE520-celler blitt brukt til å utforske rollen til fibroblastvekstfaktorreseptor-lignende 1 (FGFRL1). Studier har vist at FGFRL1-mangelfulle KYSE520-celler utviser redusert tumorvekst og motilitet, i tillegg til en reduksjon i uttrykket av matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) og fibroblastvekstfaktorbindende protein 1 (FGFBP1). Disse funnene understreker betydningen av FGFRL1 i tumorutvikling og antyder potensielle terapeutiske mål. I tillegg gir EMP-dynamikken og de assosierte molekylære veiene i KYSE520-celler innsikt i ESCC-progresjon og resistensmekanismer, noe som kan bidra til utvikling av målrettede behandlinger.

Vev
Øsofagus
Sykdom
Plateepitelkarsinom
Synonymer
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KYSE520 (Cytion-katalognummer 305449)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Uttrykk og mottakelighet

Onkogener
TP53, MYC
Mutasjonsprofil
Mutasjon: TP53, c.376-2A>T, spleiseakseptormutasjon

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
Ham's F12, m: 1,0 mM stabil glutamin, m: 1,0 mM natriumpyruvat, m: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820600a) + RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a); 1:1 blanding
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 2 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
0,6–1,2 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
58 år
Etnisitet
Japansk