Gå direkt till innehållet
KYSE520
Vävnad
Esofagus
Sjukdom
Skivepitelcancer
Synonymer
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

KYSE520

Cell line · Produktnummer 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

KYSE520-cellinjen är en human ESCC-modell (esophageal squamous cell carcinoma) som härrör från en primär tumör. Den är måttligt differentierad och har varit viktig för att undersöka epitelial-mesenkymal plasticitet (EMP) i matstrupscancer. KYSE520-cellerna uppvisar heterogenitet och består av både epitelliknande (CD44v+) och mesenkymalliknande (CD44v-) subpopulationer. Dessa två populationer kan omvandlas till varandra, vilket återspeglar en dynamisk EMP-process. Denna egenskap gör KYSE520 till en utmärkt modell för att studera cancerstamcellsegenskaper och kemoresistensmekanismer i ESCC.

Genetiskt uppvisar KYSE520-cellerna en anmärkningsvärd epigenetisk reglering. Promotorregionen för JAM3-genen, en tumörsuppressor, är ometylerad i dessa celler, vilket möjliggör dess uttryck. JAM3 spelar en roll i regleringen av cellproliferation, migration och invasion genom Wnt/β-cateninsignalering. Upprätthållandet av JAM3-uttryck i KYSE520 har kopplats till undertryckandet av aggressiva cancerfenotyper.

I terapeutisk forskning har KYSE520-celler använts för att utforska rollen för fibroblast growth factor receptor-like 1 (FGFRL1). Studier har visat att KYSE520-celler med FGFRL1-brist uppvisar minskad tumörtillväxt och motilitet, tillsammans med en minskning av uttrycket av matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) och fibroblast growth factor binding protein 1 (FGFBP1). Dessa resultat understryker betydelsen av FGFRL1 i tumörutvecklingen och föreslår potentiella terapeutiska mål. Dessutom ger EMP-dynamiken och de associerade molekylära vägarna i KYSE520-celler insikter i ESCC-progression och resistensmekanismer, vilket bidrar till utvecklingen av riktade behandlingar.

Vävnad
Esofagus
Sjukdom
Skivepitelcancer
Synonymer
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande

04Identifierare

Källa
KYSE520 (Cytion katalognummer 305449)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Uttryck och mottaglighet

Onkogener
TP53, MYC
Mutationsprofil
Mutation: TP53, c.376-2A>T, mutation av skarvacceptor

06Hantering och odling

Odlingsmedium
Ham's F12, m: 1,0 mM stabil Glutamin, m: 1,0 mM Natriumpyruvat, m: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a) + RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil Glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a); 1:1 blandning
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 2% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
0,6–1,2 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
58 år
Etnicitet
Japanska