Pereiti prie turinio
KYSE520
Audinys
Stemplė
Liga
Plokščialąstelinė karcinoma
Sinonimai
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Dokumentai

KYSE520

Cell line · Prekės numeris 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

KYSE520 ląstelių linija yra žmogaus stemplės plokščialąstelinės karcinomos (ESCC) modelis, gautas iš pirminio naviko. Ji yra vidutiniškai diferencijuota ir buvo naudinga tiriant stemplės vėžio epitelio-mezenchiminį plastiškumą (EMP). KYSE520 ląstelės pasižymi heterogeniškumu, jas sudaro epitelinės (CD44v+) ir mezenchiminės (CD44v-) subpopuliacijos. Šios dvi populiacijos gali tarpusavyje keistis, o tai rodo dinamišką EMP procesą. Dėl šios savybės KYSE520 yra puikus modelis vėžio kamieninių ląstelių savybėms ir chemorezistentiškumo mechanizmams ESCC tirti.

Genetiškai KYSE520 ląstelės pasižymi puikiu epigenetiniu reguliavimu. JAM3 geno, naviko slopintojo, promotoriaus sritis šiose ląstelėse yra nemetilinta, todėl jis gali reikštis. JAM3 vaidina svarbų vaidmenį reguliuojant ląstelių proliferaciją, migraciją ir invaziją per Wnt/β-katenino signalą. JAM3 raiškos palaikymas KYSE520 yra susijęs su agresyvių vėžio fenotipų slopinimu.

Terapiniuose tyrimuose KYSE520 ląstelės buvo naudojamos tiriant į fibroblastų augimo faktorių panašaus 1 receptoriaus (FGFRL1) vaidmenį. Tyrimai parodė, kad FGFRL1 trūkumo KYSE520 ląstelėms būdingas sumažėjęs naviko augimas ir judrumas, taip pat sumažėjusi matrikso metaloproteinazės-1 (MMP-1) ir fibroblastų augimo faktorių jungiančio baltymo 1 (FGFBP1) raiška. Šie rezultatai pabrėžia FGFRL1 svarbą navikams ir siūlo galimus terapinius taikinius. Be to, EMP dinamika ir susiję molekuliniai keliai KYSE520 ląstelėse suteikia įžvalgų apie ESCC progresavimą ir atsparumo mechanizmus, o tai padeda kurti tikslinius gydymo būdus.

Audinys
Stemplė
Liga
Plokščialąstelinė karcinoma
Sinonimai
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus

04Identifikatoriai

Nuoroda
KYSE520 (Cytion katalogo numeris 305449)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Išraiška ir jautrumas

Onkogenai
TP53, MYC
Mutacijų profilis
Mutacija: TP53, c.376-2A>T, splaisingo akceptoriaus mutacija

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilus glutaminas, w: 1,0 mM natrio piruvatas, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820600a) + RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilus glutaminas, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a); mišinys 1:1
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 2 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
0,6–1,2 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
58 metai
Etninė priklausomybė
Japonų