Pereiti prie turinio
KYSE180
Audinys
Stemplė
Liga
Plokščialąstelinė karcinoma
Sinonimai
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

Dokumentai

KYSE180

Cell line · Prekės numeris 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

KYSE180 ląstelių linija yra žmogaus stemplės plokščialąstelinio karcinomo (ESCC) modelis, gautas iš pirminio naviko. Ši ląstelių linija priskiriama vidutiniškai diferencijuotų ląstelių kategorijai ir pasižymi įvairiais ESCC būdingais genetiniais pokyčiais, įskaitant NRF2 (NFE2L2) signalinio kelio mutacijas. Tiksliau tariant, KYSE180 ląstelėse yra NRF2 D77V mutacija, kuri prisideda prie NRF2 hiperaktyvacijos – tai transkripcijos faktorius, dalyvaujantis oksidacinio streso reakcijoje ir naviko progresavime.

KYSE180 ląstelės plačiai naudojamos ESCC molekulinėms mechanizmams tirti, įskaitant atsparumą chemoterapijai ir onkogeninius signalinius kelius. Padidėjęs NRF2 aktyvumas KYSE180 ląstelėse siejamas su atsparumu chemoterapijai ir radioterapijai, nes NRF2 stiprina ląstelių antioksidacinę apsaugą ir metabolinius prisitaikymus. Naujausi tyrimai leido identifikuoti junginius, pavyzdžiui, pirimetaminą, kurie slopina NRF2 signalizaciją, dėl ko sumažėja KYSE180 ląstelių proliferacija ir navikogeniškumas. Tokie tyrimai pabrėžia terapinį potencialą, susijusį su NRF2 slopinimu vėžio atvejais, kuriuose NRF2 aktyvumas yra didelis.

Be to, KYSE180 ląstelės buvo naudojamos aldo-keto reduktazės (AKR) fermentų šeimos, ypač AKR1C1 ir AKR1C2, vaidmeniui vaistų metabolizme ir chemoprevencijoje įvertinti. Šių fermentų ekspresija KYSE180 ląstelėse yra padidėjusi, o tai padidina jautrumą tokiems agentams kaip etil-3,4-dihidroksibenzoatas (EDHB). Šis junginys sukelia apoptozę ir autofagiją, o tai rodo šios ląstelių linijos naudą tiriant reakcijas į vaistus ir ląstelių streso mechanizmus ESCC atveju.

Audinys
Stemplė
Liga
Plokščialąstelinė karcinoma
Sinonimai
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
MSI būsena
Stabilus (MSS)

04Identifikatoriai

Nuoroda
KYSE180 (Cytion katalogo numeris 305450)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1349

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
Mutacija: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), homozigotinė

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
2–4 × 10⁴/cm²
Skysčių atnaujinimas
2 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
53 metai
Etninė priklausomybė
Japonų