Ga naar de inhoud
KYSE180
Weefsel
Slokdarm
Ziekte
Plaveiselcelcarcinoom
Synoniemen
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

Documenten

KYSE180

Cell line · Productnummer 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De KYSE180-cellijn is een model voor plaveiselcelcarcinoom van de slokdarm (ESCC) bij de mens, afgeleid van een primaire tumor. Deze cellijn wordt geclassificeerd als matig gedifferentieerd en vertoont een reeks genetische veranderingen die kenmerkend zijn voor ESCC, waaronder mutaties in de NRF2 (NFE2L2)-signaalroute. KYSE180-cellen dragen met name de NRF2 D77V-mutatie, die bijdraagt aan de hyperactivatie van NRF2, een transcriptiefactor die betrokken is bij de reactie op oxidatieve stress en tumorprogressie.

KYSE180-cellen worden op grote schaal gebruikt voor onderzoek naar de moleculaire mechanismen van ESCC, waaronder chemoresistentie en oncogene signalering. Verhoogde NRF2-activiteit in KYSE180-cellen is in verband gebracht met resistentie tegen chemotherapie en radiotherapie, aangezien NRF2 de cellulaire antioxidantafweer en metabolische aanpassingen versterkt. Recent onderzoek heeft verbindingen zoals pyrimethamine geïdentificeerd die de NRF2-signalering remmen, wat leidt tot verminderde proliferatie en tumorigeniciteit van KYSE180-cellen. Dergelijke studies benadrukken het therapeutische potentieel van het richten op NRF2 bij kankers met hoge NRF2-expressie.

Daarnaast zijn KYSE180-cellen gebruikt om de rol van de aldo-keto-reductase (AKR)-enzymfamilie, met name AKR1C1 en AKR1C2, bij het metabolisme van geneesmiddelen en chemopreventie te evalueren. De expressie van deze enzymen is verhoogd in KYSE180-cellen, waardoor de gevoeligheid voor middelen zoals ethyl-3,4-dihydroxybenzoaat (EDHB) toeneemt. Deze verbinding induceert apoptose en autofagie, wat het nut van deze cellijn aantoont bij het onderzoeken van reacties op geneesmiddelen en cellulaire stressmechanismen bij ESCC.

Weefsel
Slokdarm
Ziekte
Plaveiselcelcarcinoom
Synoniemen
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
MSI-status
Stabiel (MSS)

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
KYSE180 (Cytion-catalogusnummer 305450)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1349

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), homozygoot

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
2-4*10⁴/cm²
Vloeistofverversing
2 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
53 jaar
Etnische afkomst
Japans