
- Tecido
- Esófago
- Doença
- Carcinoma de células escamosas
- Sinónimos
- KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180
Documentos
KYSE180
Cell line · Número do produto 305450
The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...
Personalização / Recomendações
- KYSE180Cell line€420.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A linha celular KYSE180 é um modelo de carcinoma de células escamosas do esófago (ESCC) humano derivado de um tumor primário. Esta linha celular é classificada como moderadamente diferenciada e apresenta uma série de alterações genéticas características do ESCC, incluindo mutações na via de sinalização do NRF2 (NFE2L2). Mais especificamente, as células KYSE180 apresentam a mutação NRF2 D77V, que contribui para a hiperativação do NRF2, um fator de transcrição envolvido na resposta ao stress oxidativo e na progressão tumoral.
As células KYSE180 são amplamente utilizadas para estudar os mecanismos moleculares do ESCC, incluindo a quimiorresistência e a sinalização oncogénica. A atividade elevada do NRF2 nas células KYSE180 tem sido associada à resistência à quimioterapia e à radioterapia, uma vez que o NRF2 potencia as defesas antioxidantes celulares e as adaptações metabólicas. Investigação recente identificou compostos como a pirimetamina que inibem a sinalização do NRF2, resultando numa redução da proliferação e da tumorigenicidade das células KYSE180. Tais estudos destacam o potencial terapêutico de se visar o NRF2 em cancros com níveis elevados de NRF2.
Além disso, as células KYSE180 têm sido utilizadas para avaliar os papéis da família de enzimas aldo-ceto redutases (AKR), particularmente a AKR1C1 e a AKR1C2, no metabolismo de fármacos e na quimioprevenção. A expressão destas enzimas está aumentada nas células KYSE180, o que aumenta a sensibilidade a agentes como o 3,4-di-hidroxibenzoato de etilo (EDHB). Este composto induz a apoptose e a autofagia, demonstrando a utilidade desta linha celular na exploração das respostas aos fármacos e dos mecanismos de stress celular no ESCC.
- Tecido
- Esófago
- Doença
- Carcinoma de células escamosas
- Sinónimos
- KYSE 180
- KYSE-180
- Kyse180
- KY180
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
- Estado do MSI
- Estável (MSS)
04Identificadores
- Referência
- KYSE180 (número de catálogo da Cytion 305450)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1349
05Expressão e suscetibilidade
- Perfil mutacional
- Mutação: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), homozigótica
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Densidade de sementeira
- 2-4*10⁴/cm²
- Renovação de fluidos
- 2 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- 53 anos
- Etnia
- Japonês
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim
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