Премини към съдържанието
KYSE180
Тъкан
Езофагус
Заболяване
Плоскоклетъчен карцином
Синоними
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

Документи

KYSE180

Cell line · Номер на продукта 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия KYSE180 е модел на плоскоклетъчен карцином на хранопровода (ESCC) при човека, получен от първичен тумор. Тази клетъчна линия се класифицира като умерено диференцирана и проявява редица генетични промени, характерни за ESCC, включително мутации в сигналния път на NRF2 (NFE2L2). По-конкретно, клетките KYSE180 притежават мутацията NRF2 D77V, която допринася за хиперактивацията на NRF2 – транскрипционен фактор, участващ в реакцията към оксидативния стрес и прогресията на тумора.

Клетките KYSE180 се използват широко за изучаване на молекулярните механизми на ESCC, включително химиорезистентността и онкогенното сигнализиране. Повишената активност на NRF2 в клетките KYSE180 е свързана с резистентност към химиотерапия и лъчетерапия, тъй като NRF2 усилва клетъчните антиоксидантни защитни механизми и метаболитните адаптации. Неотдавнашни изследвания са идентифицирали съединения като пириметамин, които инхибират NRF2 сигнализацията, което води до намалена пролиферация и туморогенност на клетките KYSE180. Такива проучвания подчертават терапевтичния потенциал на насочването към NRF2 при ракови заболявания с високи нива на NRF2.

Освен това клетките KYSE180 са използвани за оценка на ролята на семейството ензими алдо-кето редуктази (AKR), по-специално AKR1C1 и AKR1C2, в метаболизма на лекарствата и химиопревенцията. Експресията на тези ензими е повишена в клетките KYSE180, което повишава чувствителността към агенти като етил-3,4-дихидроксибензоат (EDHB). Това съединение индуцира апоптоза и автофагия, което доказва полезността на клетъчната линия при изследване на реакциите към лекарства и механизмите на клетъчния стрес при ESCC.

Тъкан
Езофагус
Заболяване
Плоскоклетъчен карцином
Синоними
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Статус на MSI
Стабилен (MSS)

04Идентификатори

Източник
KYSE180 (каталожен номер на Cytion 305450)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1349

05Проява и предразположеност

Мутационен профил
Мутация: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), хомозиготна

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
2–4 × 10⁴/см²
Обновяване на течността
2 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
53 години
Етническа принадлежност
Японски