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KYSE180
Tessuto
Esofago
Malattia
Carcinoma a cellule squamose
Sinonimi
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

Documenti

KYSE180

Cell line · Codice prodotto 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare KYSE180 è un modello di carcinoma a cellule squamose dell’esofago (ESCC) umano derivato da un tumore primario. Questa linea cellulare è classificata come moderatamente differenziata e presenta una serie di alterazioni genetiche caratteristiche dell’ESCC, tra cui mutazioni nella via di segnalazione NRF2 (NFE2L2). Nello specifico, le cellule KYSE180 presentano la mutazione NRF2 D77V, che contribuisce all’iperattivazione di NRF2, un fattore di trascrizione coinvolto nella risposta allo stress ossidativo e nella progressione tumorale.

Le cellule KYSE180 sono ampiamente utilizzate per studiare i meccanismi molecolari dell’ESCC, tra cui la chemioresistenza e la segnalazione oncogenica. L’elevata attività di NRF2 nelle cellule KYSE180 è stata associata alla resistenza alla chemioterapia e alla radioterapia, poiché NRF2 potenzia le difese antiossidanti cellulari e gli adattamenti metabolici. Ricerche recenti hanno identificato composti come la pirimetamina che inibiscono la segnalazione di NRF2, determinando una riduzione della proliferazione e della tumorigenicità delle cellule KYSE180. Tali studi evidenziano il potenziale terapeutico di un approccio mirato a NRF2 nei tumori con elevata espressione di NRF2.

Inoltre, le cellule KYSE180 sono state utilizzate per valutare il ruolo della famiglia di enzimi aldo-cheto reduttasi (AKR), in particolare AKR1C1 e AKR1C2, nel metabolismo dei farmaci e nella chemioprevenzione. L’espressione di questi enzimi è sovraregolata nelle cellule KYSE180, aumentando la sensibilità ad agenti quali l’etil-3,4-diidrossibenzoato (EDHB). Questo composto induce l’apoptosi e l’autofagia, dimostrando l’utilità della linea cellulare nell’esplorazione delle risposte ai farmaci e dei meccanismi di stress cellulare nel carcinoma esofageo squamoso (ESCC).

Tessuto
Esofago
Malattia
Carcinoma a cellule squamose
Sinonimi
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Stato MSI
Stabile (MSS)

04Identificatori

Riferimento bibliografico
KYSE180 (codice catalogo Cytion 305450)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1349

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), omozigote

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
2-4*10^4/cm²
Rinnovo dei fluidi
2 volte a settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
53 anni
Etnia
Giapponese