Pāriet uz saturu
KYSE180
Audums
Barības vads
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

Dokumenti

KYSE180

Cell line · Preces numurs 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Šūnu līnija KYSE180 ir cilvēka barības vada plakanšūnu karcinomas (ESCC) modelis, kas iegūts no primārā audzēja. Šī šūnu līnija tiek klasificēta kā vidēji diferencēta un tai piemīt virkne ESCC raksturīgu ģenētisku izmaiņu, tostarp mutācijas NRF2 (NFE2L2) signālceļā. Konkrēti, KYSE180 šūnās ir NRF2 D77V mutācija, kas veicina NRF2 hiperaktivāciju — NRF2 ir transkripcijas faktors, kas iesaistīts oksidatīvā stresa reakcijā un audzēja progresēšanā.

KYSE180 šūnas plaši izmanto, lai pētītu ESCC molekulāros mehānismus, tostarp rezistenci pret ķīmijterapiju un onkogēno signālizāciju. Paaugstināta NRF2 aktivitāte KYSE180 šūnās ir saistīta ar rezistenci pret ķīmijterapiju un staru terapiju, jo NRF2 pastiprina šūnu antioksidatīvo aizsardzību un metaboliskās adaptācijas. Nesenie pētījumi ir identificējuši tādas vielas kā pirimetamīns, kas inhibē NRF2 signālceļu, rezultātā samazinot KYSE180 šūnu proliferāciju un tumorigenitāti. Šādi pētījumi uzsver NRF2 mērķtiecīgas iedarbības terapeitisko potenciālu vēža veidos ar augstu NRF2 līmeni.

Turklāt KYSE180 šūnas ir izmantotas, lai novērtētu aldo-keto reduktāzes (AKR) enzīmu ģimenes, jo īpaši AKR1C1 un AKR1C2, lomu zāļu metabolizmā un ķīmiskajā profilaksē. Šo fermentu ekspresija KYSE180 šūnās ir paaugstināta, kas palielina jutību pret tādiem līdzekļiem kā etil-3,4-dihidroksibenzoāts (EDHB). Šis savienojums izraisa apoptozi un autofāgiju, apliecinot šīs šūnu līnijas lietderību ESCC zāļu reakciju un šūnu stresa mehānismu izpētē.

Audums
Barības vads
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
MSI statuss
Stabils (MSS)

04Identifikatori

Atsauce
KYSE180 (Cytion kataloga numurs 305450)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1349

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), homozigota

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
2–4 × 10⁴/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
53 gadi
Etniskā piederība
Japāņu