Gå til innholdet
KYSE180
Vev
Øsofagus
Sykdom
Plateepitelkarsinom
Synonymer
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

Dokumenter

KYSE180

Cell line · Produktnummer 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

KYSE180-cellelinjen er en modell for humant plateepitelkarsinom i spiserøret (ESCC) som stammer fra en primærtumor. Denne cellelinjen er klassifisert som moderat differensiert og viser en rekke genetiske forandringer som er karakteristiske for ESCC, herunder mutasjoner i NRF2 (NFE2L2)-signalveien. Spesielt bærer KYSE180-cellene NRF2 D77V-mutasjonen, som bidrar til hyperaktivering av NRF2, en transkripsjonsfaktor involvert i responsen på oksidativt stress og tumorprogresjon.

KYSE180-celler brukes i stor utstrekning til å studere de molekylære mekanismene ved ESCC, herunder kjemoresistens og onkogen signalering. Økt NRF2-aktivitet i KYSE180-celler har blitt knyttet til resistens mot kjemoterapi og strålebehandling, ettersom NRF2 styrker cellenes antioksidantforsvar og metabolske tilpasninger. Nyere forskning har identifisert forbindelser som pyrimetamin som hemmer NRF2-signalering, noe som resulterer i redusert proliferasjon og tumorigenisitet hos KYSE180-celler. Slike studier understreker det terapeutiske potensialet ved å målrette NRF2 i kreftformer med høyt NRF2-nivå.

I tillegg har KYSE180-celler blitt brukt til å evaluere rollene til enzymfamilien aldo-ketoreduktase (AKR), særlig AKR1C1 og AKR1C2, i legemiddelmetabolisme og kjemoprevensjon. Ekspresjonen av disse enzymene er oppregulert i KYSE180-celler, noe som øker følsomheten overfor midler som etyl-3,4-dihydroksybenzoat (EDHB). Dette stoffet induserer apoptose og autofagi, noe som viser at cellelinjen er nyttig for å utforske legemiddelresponser og cellulære stressmekanismer ved ESCC.

Vev
Øsofagus
Sykdom
Plateepitelkarsinom
Synonymer
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
MSI-status
Stabil (MSS)

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KYSE180 (Cytion-katalognummer 305450)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1349

05Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil
Mutasjon: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), homozygot

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2–4 × 10⁴/cm²
Væskefornyelse
2 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
53 år
Etnisitet
Japansk