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KYSE180
Gewebe
Speiseröhre
Krankheit
Plattenepithelkarzinom
Synonyme
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

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KYSE180

Cell line · Artikelnummer 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie KYSE180 ist ein aus einem Primärtumor gewonnenes Modell für das humane Plattenepithelkarzinom der Speiseröhre (ESCC). Diese Zelllinie wird als mäßig differenziert eingestuft und weist eine Reihe von für ESCC charakteristischen genetischen Veränderungen auf, darunter Mutationen im NRF2 (NFE2L2)-Signalweg. Insbesondere weisen KYSE180-Zellen die NRF2-D77V-Mutation auf, die zur Hyperaktivierung von NRF2 beiträgt, einem Transkriptionsfaktor, der an der Reaktion auf oxidativen Stress und der Tumorprogression beteiligt ist.

KYSE180-Zellen werden häufig zur Untersuchung der molekularen Mechanismen des ESCC eingesetzt, darunter Chemoresistenz und onkogene Signalwege. Eine erhöhte NRF2-Aktivität in KYSE180-Zellen wurde mit einer Resistenz gegenüber Chemotherapie und Strahlentherapie in Verbindung gebracht, da NRF2 die zellulären antioxidativen Abwehrmechanismen und metabolischen Anpassungen verstärkt. Jüngste Forschungsarbeiten haben Verbindungen wie Pyrimethamin identifiziert, die die NRF2-Signalübertragung hemmen, was zu einer verminderten Proliferation und Tumorigenität von KYSE180-Zellen führt. Solche Studien unterstreichen das therapeutische Potenzial einer gezielten Beeinflussung von NRF2 bei Krebserkrankungen mit hohem NRF2-Spiegel.

Darüber hinaus wurden KYSE180-Zellen genutzt, um die Rolle der Enzymfamilie der Aldo-Keto-Reduktasen (AKR), insbesondere von AKR1C1 und AKR1C2, beim Arzneimittelstoffwechsel und bei der Chemoprävention zu untersuchen. Die Expression dieser Enzyme ist in KYSE180-Zellen hochreguliert, was die Empfindlichkeit gegenüber Wirkstoffen wie Ethyl-3,4-dihydroxybenzoat (EDHB) erhöht. Diese Verbindung induziert Apoptose und Autophagie, was die Eignung der Zelllinie für die Erforschung von Arzneimittelreaktionen und zellulären Stressmechanismen bei ESCC unterstreicht.

Gewebe
Speiseröhre
Krankheit
Plattenepithelkarzinom
Synonyme
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
MSI-Status
Stabil (MSS)

04Bezeichner

Quellenangabe
KYSE180 (Cytion-Katalognummer 305450)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1349

05Expression und Anfälligkeit

Mutationsprofil
Mutation: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), homozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
2–4 × 10⁴/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
53 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Japanisch