Prejsť na obsah
KYSE180
Tkanivo
Pažerák
Choroba
Spinocelulárny karcinóm
Synonymá
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

Dokumenty

KYSE180

Cell line · Číslo výrobku 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka KYSE180 je model karcinómu dlaždicových buniek pažeráka (ESCC) odvodený z primárneho nádoru. Táto bunková línia je klasifikovaná ako stredne diferencovaná a vykazuje rad genetických zmien charakteristických pre ESCC, vrátane mutácií v signálnej dráhe NRF2 (NFE2L2). Konkrétne, bunky KYSE180 nesú mutáciu NRF2 D77V, ktorá prispieva k hyperaktivácii NRF2, transkripčného faktora zapojeného do reakcie na oxidačný stres a progresiu nádoru.

Bunky KYSE180 sa široko využívajú na štúdium molekulárnych mechanizmov ESCC, vrátane chemorezistencie a onkogénnej signalizácie. Zvýšená aktivita NRF2 v bunkách KYSE180 bola spojená s rezistenciou voči chemoterapii a rádioterapii, keďže NRF2 posilňuje bunkovú antioxidačnú obranu a metabolické adaptácie. Nedávny výskum identifikoval zlúčeniny, ako je pyrimetamín, ktoré inhibujú signalizáciu NRF2, čo vedie k zníženej proliferácii a tumorigenicite buniek KYSE180. Takéto štúdie zdôrazňujú terapeutický potenciál zamerania sa na NRF2 pri nádoroch s vysokou expresiou NRF2.

Okrem toho sa bunky KYSE180 využívajú na hodnotenie úlohy enzýmov z rodiny aldo-keto reduktáz (AKR), najmä AKR1C1 a AKR1C2, v metabolizme liekov a chemoprevencii. Expresia týchto enzýmov je v bunkách KYSE180 zvýšená, čo zvyšuje citlivosť na látky, ako je etyl-3,4-dihydroxybenzoát (EDHB). Táto zlúčenina indukuje apoptózu a autofágiu, čo dokazuje užitočnosť tejto bunkovej línie pri skúmaní reakcií na lieky a mechanizmov bunkového stresu pri ESCC.

Tkanivo
Pažerák
Choroba
Spinocelulárny karcinóm
Synonymá
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Stav MSI
Stabilný (MSS)

04Identifikátory

Citácia
KYSE180 (katalógové číslo Cytion 305450)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1349

05Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Mutácia: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), homozygotná

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
2–4 × 10⁴/cm²
Obnova kvapaliny
2 krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
53 rokov
Etnická príslušnosť
Japonský