Prejsť na obsah
KYSE-30
Tkanivo
Skvamózny epitel pažeráka
Choroba
Skvamocelulárny karcinóm pažeráka
Synonymá
Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030

Dokumenty

KYSE-30

Cell line · Číslo výrobku 305094

KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

KYSE-30 je dobre diferencovaná ľudská bunková línia skvamózneho karcinómu pažeráka (ESCC) odvodená z primárneho nádoru u dospelého pacienta. Ako súčasť série KYSE bola táto bunková línia vytvorená na štúdium molekulárnych a bunkových charakteristík rakoviny pažeráka. Bunky KYSE-30 sa vyznačujú rýchlou proliferáciou s časom zdvojnásobenia 20,8 hodiny, čo z nich robí robustný model pre výskum rakoviny in vitro. Tieto bunky rastú prevažne ako adherentné monovrstvy, majú charakteristický polygonálny tvar a jednotný vzhľad pri fázovej kontrastnej mikroskopii. Ich rastový model je typický pre epitelové nádorové bunky, ktoré vytvárajú tesné kolónie s tendenciou k neorganizovanému hromadeniu, čo odráža invazívnu povahu nádoru, z ktorého boli odvodené.

Z genetického hľadiska je KYSE-30 významný svojimi zmenami v kľúčových nádorových supresorových génoch. Bunková línia vykazuje divoký typ génov p16 (INK4a) a p15 (INK4b), ale nesie pozoruhodnú bodovú mutáciu v géne p16, ktorá vedie k predčasnému stop kodónu, čo vedie k skráteniu nefunkčného proteínu. Táto mutácia pravdepodobne prispieva k strate kontroly bunkového cyklu a podporuje nekontrolovanú proliferáciu charakteristickú pre rakovinové bunky. Zachovanie divokého typu génu p15 však naznačuje, že zmeny génu p16 zohrávajú v onkogenéze KYSE-30 rozhodujúcejšiu úlohu, čo môže byť dôležité v štúdiách zameraných na rozdielnu úlohu týchto génov v rakovine.

KYSE-30 je tumorogénny, čo dokazuje jeho schopnosť vytvárať nádory po injekčnom podaní atýmovým nahým myšiam, čo z neho robí vynikajúci model pre štúdie ESCC in vivo. Histologické vyšetrenie nádorov vytvorených bunkami KYSE-30 vykazuje vlastnosti podobné pôvodnému skvamocelulárnemu karcinómu, čo poskytuje verné zobrazenie ochorenia. Táto bunková línia je neoceniteľná pre výskum mechanizmov tumorigenézy, genetických a epigenetických zmien, ktoré sú príčinou vzniku rakoviny pažeráka, a pre vývoj cielenej terapie, hoci nie je vhodná na terapeutické alebo in vivo aplikácie.

Tkanivo
Skvamózny epitel pažeráka
Choroba
Skvamocelulárny karcinóm pažeráka
Synonymá
  • Kyse-30
  • KYSE 30
  • KYSE30
  • Kyse30
  • KYSE0030

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epiteloidný, s dlhým pseudopodom
Doba zdvojnásobenia
20 až 30 hodín

04Identifikátory

Citácia
KYSE-30 (katalógové číslo Cytion 305094)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1351

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Zmiešajte Ham's F12 a RPMI 1640 v pomere 50:50 (čísla článkov Cytion 820600a a 820702a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
64 rokov
Etnická príslušnosť
Ázijské