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KYSE-30
Tissu
Épithélium pavimenteux de l'œsophage
Maladie
Carcinome épidermoïde de l'œsophage
Synonymes
Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030

Documents

KYSE-30

Cell line · Référence du produit 305094

KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...

€430.00hors taxes et frais de port
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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
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1

01Informations générales

Description

KYSE-30 est une lignée cellulaire humaine bien différenciée de carcinome épidermoïde de l'œsophage (ESCC) dérivée d'une tumeur primaire chez un patient adulte. Faisant partie de la série KYSE, cette lignée cellulaire a été créée pour étudier les caractéristiques moléculaires et cellulaires du cancer de l'œsophage. Les cellules KYSE-30 se distinguent par leur prolifération rapide, avec un temps de doublement de 20,8 heures, ce qui en fait un modèle robuste pour la recherche in vitro sur le cancer. Ces cellules se développent principalement sous forme de monocouches adhérentes, présentant une forme polygonale caractéristique et un aspect uniforme au microscope à contraste de phase. Leur mode de croissance est typique des cellules cancéreuses dérivées de l'épithélium, formant des colonies serrées avec une tendance à s'empiler de manière désorganisée, reflétant la nature invasive de la tumeur dont elles sont dérivées.

D'un point de vue génétique, KYSE-30 est significative pour ses altérations dans les gènes suppresseurs de tumeurs clés. La lignée cellulaire présente une configuration de type sauvage pour les gènes p16 (INK4a) et p15 (INK4b), mais elle porte une mutation ponctuelle notable dans le gène p16 qui entraîne un codon stop prématuré, conduisant à une protéine tronquée et non fonctionnelle. Cette mutation contribue probablement à la perte de contrôle du cycle cellulaire, favorisant la prolifération incontrôlée caractéristique des cellules cancéreuses. Le maintien du gène p15 de type sauvage suggère cependant que les altérations du gène p16 jouent un rôle plus critique dans l'oncogenèse de KYSE-30, ce qui peut être pertinent dans les études axées sur les rôles différentiels de ces gènes dans le cancer.

KYSE-30 est tumorigène, comme le montre sa capacité à former des tumeurs lorsqu'il est injecté dans des souris nude athymiques, ce qui en fait un excellent modèle pour les études in vivo de l'ESCC. L'examen histologique des tumeurs formées par les cellules KYSE-30 présente des caractéristiques similaires à celles du carcinome épidermoïde d'origine, ce qui constitue une représentation fidèle de la maladie. Cette lignée cellulaire est précieuse pour la recherche sur les mécanismes de la tumorigenèse, les changements génétiques et épigénétiques à l'origine du cancer de l'œsophage et le développement de thérapies ciblées, bien qu'elle ne soit pas adaptée à des applications thérapeutiques ou in vivo.

Tissu
Épithélium pavimenteux de l'œsophage
Maladie
Carcinome épidermoïde de l'œsophage
Synonymes
  • Kyse-30
  • KYSE 30
  • KYSE30
  • Kyse30
  • KYSE0030

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial, avec un long pseudopode
Temps de doublement
20 à 30 heures

04Identifiants

Référence
KYSE-30 (numéro de catalogue Cytion 305094)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1351

05Manipulation et culture

Milieu de culture
Veuillez mélanger Ham's F12 et RPMI 1640 dans un rapport 50:50 (numéros d'article Cytion 820600a et 820702a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
64 ans
Origine ethnique
Asiatique