KYSE-30

KYSE-30 je dobře diferencovaná buněčná linie lidského spinocelulárního karcinomu jícnu (ESCC) odvozená z primárního nádoru dospělého pacienta. Tato buněčná linie byla jako součást série KYSE založena za účelem studia molekulárních a buněčných charakteristik karcinomu jícnu. Buňky KYSE-30 se vyznačují rychlou proliferací s dobou zdvojení 20,8 hodiny, což z nich činí robustní model pro výzkum rakoviny in vitro. Tyto buňky rostou převážně jako adherentní monovrstvy, vykazují charakteristický polygonální tvar a jednotný vzhled při fázově kontrastní mikroskopii. Jejich růstový vzorec je typický pro nádorové buňky odvozené od epitelu, tvoří těsně pohromadě kolonie s tendencí k neuspořádanému hromadění, což odráží invazivní povahu nádoru, z něhož byly odvozeny.

Z genetického hlediska je KYSE-30 významný svými změnami v klíčových nádorových supresorových genech. Buněčná linie vykazuje divoký typ genů p16 (INK4a) a p15 (INK4b), ale nese pozoruhodnou bodovou mutaci v genu p16, která vede k předčasnému stop kodonu, což vede ke zkrácení nefunkčního proteinu. Tato mutace pravděpodobně přispívá ke ztrátě kontroly buněčného cyklu a podporuje nekontrolovanou proliferaci charakteristickou pro nádorové buňky. Zachování divokého typu genu p15 však naznačuje, že změny genu p16 hrají v onkogenezi KYSE-30 zásadnější roli, což může mít význam ve studiích zaměřených na rozdílné role těchto genů v rakovině.

KYSE-30 je tumorigenní, což dokazuje jeho schopnost vytvářet nádory po injekčním podání athymickým nahým myším, což z něj činí vynikající model pro in vivo studie ESCC. Histologické vyšetření nádorů vytvořených buňkami KYSE-30 vykazuje charakteristiky podobné původnímu dlaždicobuněčnému karcinomu, což poskytuje věrné zobrazení onemocnění. Tato buněčná linie je neocenitelná pro výzkum mechanismů tumorigeneze, genetických a epigenetických změn, které jsou příčinou vzniku karcinomu jícnu, a pro vývoj cílené terapie, ačkoli není vhodná pro terapeutické nebo in vivo aplikace.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení