KYSE-30

A KYSE-30 é uma linha celular de carcinoma de células escamosas do esófago humano bem diferenciado (ESCC) derivada de um tumor primário de um doente adulto. Como parte da série KYSE, esta linha celular foi criada para estudar as caraterísticas moleculares e celulares do cancro do esófago. As células KYSE-30 distinguem-se pela sua rápida proliferação, com um tempo de duplicação de 20,8 horas, o que as torna um modelo robusto para a investigação in vitro do cancro. Estas células crescem predominantemente como monocamadas aderentes, apresentando uma forma poligonal caraterística e um aspeto uniforme sob microscopia de contraste de fase. O seu padrão de crescimento é típico das células cancerígenas derivadas do epitélio, formando colónias bem compactadas com uma tendência para se amontoarem de forma desorganizada, reflectindo a natureza invasiva do tumor de que derivam.

Geneticamente, a KYSE-30 é significativa pelas suas alterações em genes supressores de tumores chave. A linha de células apresenta uma configuração de tipo selvagem para os genes p16 (INK4a) e p15 (INK4b), mas é portadora de uma notável mutação pontual no gene p16 que resulta num códão de paragem prematuro, conduzindo a uma proteína truncada e não funcional. Esta mutação contribui provavelmente para a perda do controlo do ciclo celular, promovendo a proliferação descontrolada caraterística das células cancerígenas. A retenção do gene p15 de tipo selvagem, no entanto, sugere que as alterações do gene p16 desempenham um papel mais crítico na oncogénese do KYSE-30, o que pode ser relevante em estudos centrados nos papéis diferenciais destes genes no cancro.

O KYSE-30 é tumorigénico, como demonstrado pela sua capacidade de formar tumores quando injetado em ratinhos nude atímicos, o que o torna um excelente modelo para estudos in vivo de ESCC. O exame histológico dos tumores formados pelas células KYSE-30 apresenta caraterísticas semelhantes às do carcinoma espinocelular original, constituindo uma representação fiel da doença. Esta linha celular é de valor inestimável para a investigação dos mecanismos de tumorigénese, das alterações genéticas e epigenéticas que determinam o cancro do esófago e para o desenvolvimento de terapias orientadas, embora não seja adequada para aplicações terapêuticas ou in vivo.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia