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KYSE-410
Tecido
Esófago
Doença
Carcinoma de células escamosas do esófago
Sinónimos
KYSE 410, KYSE410, Kyse410, KYSE0410

Documentos

KYSE-410

Cell line · Número do produto 305122

KYSE-410 is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line that was established from a primary tumor resected from an adult patient. This cel...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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01Informações gerais

Descrição

KYSE-410 é uma linha celular de carcinoma de células escamosas do esófago humano (ESCC) que foi estabelecida a partir de um tumor primário ressecado de um doente adulto. Esta linha celular faz parte da série KYSE, que inclui vários modelos de ESCC concebidos para fornecer uma ferramenta abrangente para o estudo dos vários aspectos do cancro do esófago. As células KYSE-410 têm um tempo de duplicação de 24,2 horas, o que reflecte uma capacidade proliferativa moderada. Crescem como monocamadas aderentes, uma caraterística comum entre as células cancerígenas derivadas do epitélio, e exibem uma morfologia relativamente uniforme sob microscopia de contraste de fase.

A nível genético, o KYSE-410 é particularmente notável pelas suas alterações epigenéticas. O gene p16 (INK4a) no KYSE-410 apresenta hipermetilação das ilhas CpG 5', uma modificação que leva ao silenciamento deste gene supressor de tumor crucial. Esta alteração epigenética é um importante fator de oncogénese em muitos cancros, incluindo o CECS, uma vez que resulta na perda da regulação do ciclo celular e na proliferação celular descontrolada. Apesar disso, a linhagem KYSE-410 mantém uma configuração de tipo selvagem para o gene p15 (INK4b), evidenciando uma inativação selectiva de p16 que é típica de certos subtipos de cancro.

A linha celular KYSE-410 é tumorigénica, como demonstrado pela sua capacidade de induzir a formação de tumores quando implantada em ratinhos nude atímicos. A análise histológica destes tumores mostra caraterísticas consistentes com o carcinoma de células escamosas, tornando a KYSE-410 um modelo relevante para estudos in vivo. Esta linha celular é muito valiosa para a investigação centrada na compreensão do papel das modificações epigenéticas na progressão do cancro, bem como para testar a eficácia das terapias que visam os reguladores epigenéticos, embora não se destine a aplicações terapêuticas ou in vivo.

Tecido
Esófago
Doença
Carcinoma de células escamosas do esófago
Sinónimos
  • KYSE 410
  • KYSE410
  • Kyse410
  • KYSE0410

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tempo de duplicação
32 a 45 horas

04Identificadores

Referência
KYSE-410 (número de catálogo da Cytion 305122)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1352

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1-3*10⁴/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
51 anos
Etnia
Asiático