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KYSE-150
Tecido
Esófago
Doença
Carcinoma de células escamosas do esófago
Sinónimos
KYSE 150, KYSE150, Kyse150, KY150

Documentos

KYSE-150

Cell line · Número do produto 305087

The KYSE-150 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor resected from an adult patient. This cell l...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular KYSE-150 é um modelo de carcinoma de células escamosas do esófago humano (ESCC) derivado de um tumor primário ressecado de um doente adulto. Esta linha de células faz parte da série KYSE, que foi desenvolvida para fornecer um modelo in vitro fiável para o estudo da patobiologia do cancro do esófago, nomeadamente para compreender a tumorigénese e a resposta terapêutica. As células KYSE-150 apresentam um tempo de duplicação rápido de 13,7 horas, o que indica uma elevada capacidade proliferativa, caraterística dos fenótipos agressivos do cancro. Estas células crescem em cultura em monocamada, aderindo ao substrato e formando uma folha uniforme, o que é típico das células cancerígenas derivadas do epitélio.

A análise genética da KYSE-150 revela alterações significativas nos principais genes supressores de tumores, nomeadamente no gene p16 (INK4a). Esta linha celular apresenta aberrações no gene p16, nomeadamente sob a forma de metilação de ilhas CpG, que silencia o gene e contribui para a perda de regulação do ciclo celular. Esta modificação epigenética é um mecanismo comum em muitos cancros e realça a relevância do KYSE-150 para o estudo do silenciamento dos genes e do seu papel na progressão do cancro. Além disso, a linha celular mantém a configuração de tipo selvagem do gene p15, sugerindo um mecanismo de inativação selectiva do p16 em relação ao p15 neste modelo, o que pode ter interesse em estudos de genómica comparativa.

O KYSE-150 é valioso não só para estudar os mecanismos moleculares e celulares do CECS, mas também para explorar os efeitos das alterações genéticas e epigenéticas no cancro. Constitui um modelo robusto para a investigação de intervenções terapêuticas que visam as vias específicas desreguladas no carcinoma espinocelular do esófago. Dada a sua elevada taxa de proliferação e perfil genético específico, o KYSE-150 é um candidato adequado para testes farmacológicos in vitro e outras aplicações relacionadas com a investigação do cancro, mas não para fins terapêuticos ou in vivo.

Tecido
Esófago
Doença
Carcinoma de células escamosas do esófago
Sinónimos
  • KYSE 150
  • KYSE150
  • Kyse150
  • KY150

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tempo de duplicação
25 horas

04Identificadores

Referência
KYSE-150 (número de catálogo da Cytion 305087)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1348

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
Misturar Ham's F12 e RPMI 1640 numa proporção de 50:50 (números de artigo Cytion 820600a e 820702a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 5% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
49 anos
Etnia
Asiático