Mine otse sisu juurde
KYSE-150
Kude
Söögitoru
Haigus
Söögitoru laikerkartsinoom
Sünonüümid
KYSE 150, KYSE150, Kyse150, KY150

Dokumendid

KYSE-150

Cell line · Toote number 305087

The KYSE-150 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor resected from an adult patient. This cell l...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KYSE-150 rakuliin on inimese söögitoru lamerakk-kartsinoomi (ESCC) mudel, mis on saadud täiskasvanud patsiendilt resekteeritud primaarsest kasvajast. See rakuliin kuulub KYSE-seeriasse, mis on välja töötatud usaldusväärse in vitro mudeli loomiseks söögitoruvähi patobioloogia uurimiseks, eelkõige kasvajate tekke ja ravivastuse mõistmiseks. KYSE-150 rakkude kiire kahekordistumisaeg on 13,7 tundi, mis näitab suurt proliferatsioonivõimet, mis on iseloomulik agressiivsele vähi fenotüübile. Need rakud kasvavad monokihilises kultuuris, kleepuvad substraadi külge ja moodustavad ühtlase lehe, mis on tüüpiline epiteelist pärinevatele vähirakkudele.

KYSE-150 geneetiline analüüs näitab olulisi muutusi peamistes kasvajasupressorgeenides, eriti p16 (INK4a) geenis. Sellel rakuliinil on p16 geenis kõrvalekaldeid, eriti CpG-saarte metülatsiooni näol, mis vaigistab geeni ja aitab kaasa rakutsükli regulatsiooni kadumisele. See epigeneetiline modifikatsioon on paljude vähkkasvajate puhul levinud mehhanism ja rõhutab KYSE-150 olulisust geenide vaigistamise ja selle rolli uurimisel vähi progresseerumises. Lisaks säilitab rakuliin p15 geeni metsikut tüüpi konfiguratsiooni, mis viitab p16 selektiivsele inaktiveerimismehhanismile p15 suhtes selles mudelis, mis võib pakkuda huvi võrdlevates genoomiuuringutes.

KYSE-150 ei ole väärtuslik mitte ainult ESCC molekulaar- ja rakumehhanismide uurimiseks, vaid ka geneetiliste ja epigeneetiliste muutuste mõju uurimiseks vähi puhul. See pakub tugeva mudeli selliste terapeutiliste sekkumiste uurimiseks, mis on suunatud söögitoru lamerakk-kartsinoomi puhul düsreguleeritud spetsiifilistele radadele. Arvestades selle kõrget proliferatsioonikiirust ja spetsiifilist geneetilist profiili, on KYSE-150 sobiv kandidaat in vitro farmakoloogilisteks testideks ja muudeks vähiuuringutega seotud rakendusteks, kuid mitte terapeutilisteks või in vivo eesmärkideks.

Kude
Söögitoru
Haigus
Söögitoru laikerkartsinoom
Sünonüümid
  • KYSE 150
  • KYSE150
  • Kyse150
  • KY150

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Kahekordistumisaeg
25 tundi

04Tunnused

Viide
KYSE-150 (Cytioni katalooginumber 305087)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1348

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Palun segage Ham's F12 ja RPMI 1640 50:50 vahekorras (Cytioni artikli numbrid 820600a ja 820702a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada keskkonda 5% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
49 aastat
Etniline kuuluvus
Aasia