Премини към съдържанието
KYSE-150
Тъкан
Езофагус
Заболяване
Езофагеален плоскоклетъчен карцином
Синоними
KYSE 150, KYSE150, Kyse150, KY150

Документи

KYSE-150

Cell line · Номер на продукта 305087

The KYSE-150 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor resected from an adult patient. This cell l...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия KYSE-150 е модел на човешки езофагеален плоскоклетъчен карцином (ESCC), получен от първичен тумор, отстранен от възрастен пациент. Тази клетъчна линия е част от серията KYSE, която е разработена, за да осигури надежден in vitro модел за изучаване на патобиологията на рака на хранопровода, по-специално за разбиране на туморогенезата и терапевтичния отговор. Клетките KYSE-150 се характеризират с бързо удвояване от 13,7 часа, което показва висок пролиферативен капацитет, характерен за агресивните ракови фенотипове. Тези клетки растат в еднослойна култура, като се придържат към субстрата и образуват равномерен лист, което е типично за раковите клетки от епителен произход.

Генетичният анализ на KYSE-150 разкрива значителни промени в ключови туморсупресорни гени, по-специално в гена p16 (INK4a). Тази клетъчна линия показва аберации в гена p16, по-специално под формата на метилиране на CpG острови, което заглушава гена и допринася за загубата на регулацията на клетъчния цикъл. Тази епигенетична модификация е често срещан механизъм при много видове рак и подчертава значението на KYSE-150 за изучаване на заглушаването на гени и ролята му в прогресията на рака. Освен това клетъчната линия запазва конфигурацията на дивия тип на гена p15, което предполага механизъм на селективно инактивиране на p16 спрямо p15 в този модел, което може да представлява интерес при сравнителните геномни изследвания.

KYSE-150 е ценен не само за изучаване на молекулярните и клетъчните механизми на ESCC, но и за изследване на ефектите от генетичните и епигенетичните промени при рака. Той предоставя надежден модел за изследване на терапевтични интервенции, насочени към специфичните пътища, дисрегулирани при плоскоклетъчния карцином на хранопровода. Като се има предвид високата му степен на пролиферация и специфичният генетичен профил, KYSE-150 е подходящ кандидат за in vitro фармакологични изпитвания и други приложения, свързани с изследвания на рака, но не и за терапевтични или in vivo цели.

Тъкан
Езофагус
Заболяване
Езофагеален плоскоклетъчен карцином
Синоними
  • KYSE 150
  • KYSE150
  • Kyse150
  • KY150

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален
Време за удвояване
25 часа

04Идентификатори

Източник
KYSE-150 (каталожен номер на Cytion 305087)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1348

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
Моля, смесете Ham's F12 и RPMI 1640 в съотношение 50:50 (номера на изделията на Cytion 820600a и 820702a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 5% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
49 години
Етническа принадлежност
Азиатски