İçeriğe atla
KYSE-150
Doku
Özofagus
Hastalık
Özofagus skuamöz hücreli karsinomu
Eş anlamlılar
KYSE 150, KYSE150, Kyse150, KY150

KYSE-150

Cell line · Ürün numarası 305087

The KYSE-150 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor resected from an adult patient. This cell l...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

KYSE-150 hücre hattı, yetişkin bir hastadan rezeke edilen bir primer tümörden türetilen bir insan özofagus skuamöz hücreli karsinom (ESCC) modelidir. Bu hücre hattı, özofagus kanserinin patobiyolojisini incelemek, özellikle de tümörigenez ve terapötik yanıtı anlamak için güvenilir bir in vitro model sağlamak üzere geliştirilen KYSE serisinin bir parçasıdır. KYSE-150 hücreleri, agresif kanser fenotiplerinin karakteristiği olan yüksek proliferatif kapasiteye işaret eden 13,7 saatlik hızlı bir ikiye katlanma süresi sergiler. Bu hücreler tek tabakalı kültürde büyür, alt tabakaya yapışır ve epitelyal türevli kanser hücreleri için tipik olan düzgün bir tabaka oluşturur.

KYSE-150'nin genetik analizi, başta p16 (INK4a) geni olmak üzere temel tümör baskılayıcı genlerde önemli değişiklikler olduğunu ortaya koymaktadır. Bu hücre hattı, p16 geninde, özellikle geni susturan ve hücre döngüsü düzenlemesinin kaybına katkıda bulunan CpG adası metilasyonu şeklinde sapmalar göstermektedir. Bu epigenetik modifikasyon birçok kanserde yaygın bir mekanizmadır ve KYSE-150'nin gen susturma ve kanser ilerlemesindeki rolünü incelemek için uygunluğunu vurgular. Ayrıca, hücre hattı p15 geninin vahşi tip konfigürasyonunu korur, bu da bu modelde p16 için p15'e göre seçici bir inaktivasyon mekanizması olduğunu düşündürür, bu da karşılaştırmalı genomik çalışmalarda ilgi çekici olabilir.

KYSE-150 sadece ESCC'nin moleküler ve hücresel mekanizmalarını incelemek için değil, aynı zamanda genetik ve epigenetik değişikliklerin kanserdeki etkilerini araştırmak için de değerlidir. Özofagus skuamöz hücreli karsinomunda düzensiz olarak düzenlenen spesifik yolları hedef alan terapötik müdahaleleri araştırmak için sağlam bir model sağlar. Yüksek proliferasyon oranı ve spesifik genetik profili göz önüne alındığında, KYSE-150 in vitro farmakolojik testler ve kanser araştırmalarıyla ilgili diğer uygulamalar için uygun bir adaydır, ancak terapötik veya in vivo amaçlar için uygun değildir.

Doku
Özofagus
Hastalık
Özofagus skuamöz hücreli karsinomu
Eş anlamlılar
  • KYSE 150
  • KYSE150
  • Kyse150
  • KY150

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
İki katına çıkma süresi
25 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
KYSE-150 (Cytion katalog numarası 305087)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1348

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Lütfen Ham's F12 ve RPMI 1640'ı 50:50 oranında karıştırın (Cytion makale numaraları 820600a ve 820702a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %5 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
49 yıl
Etnik köken
Asya