İçeriğe atla
KYSE-30
Doku
Özofagus Skuamöz Epiteli
Hastalık
Özofagus skuamöz hücreli karsinomu
Eş anlamlılar
Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030

KYSE-30

Cell line · Ürün numarası 305094

KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

KYSE-30, yetişkin bir hastadaki primer tümörden türetilen iyi farklılaşmış bir insan özofagus skuamöz hücreli karsinom (ESCC) hücre hattıdır. KYSE serisinin bir parçası olan bu hücre hattı, özofagus kanserinin moleküler ve hücresel özelliklerini incelemek için kurulmuştur. KYSE-30 hücreleri, 20,8 saatlik ikiye katlanma süresiyle hızlı çoğalmalarıyla dikkat çekmektedir ve bu da onları in vitro kanser araştırmaları için sağlam bir model haline getirmektedir. Bu hücreler ağırlıklı olarak yapışık tek tabakalar halinde büyür, faz-kontrast mikroskobu altında karakteristik bir poligonal şekil ve tek tip görünüm sergiler. Büyüme şekilleri epitelyal türevli kanser hücrelerinin tipik bir örneğidir ve türetildikleri tümörün invazif doğasını yansıtacak şekilde dağınık bir şekilde yığılma eğilimi gösteren sıkıca paketlenmiş koloniler oluştururlar.

Genetik olarak KYSE-30, kilit tümör baskılayıcı genlerdeki değişiklikleri açısından önemlidir. Hücre hattı p16 (INK4a) ve p15 (INK4b) genleri için vahşi tip bir konfigürasyon sergiler, ancak p16 geninde erken bir stop kodonuyla sonuçlanan ve kesilmiş, işlevsel olmayan bir proteine yol açan dikkate değer bir nokta mutasyonu taşır. Bu mutasyon muhtemelen hücre döngüsü kontrolünün kaybına katkıda bulunarak kanser hücrelerinin karakteristik kontrolsüz çoğalmasını teşvik eder. Bununla birlikte, vahşi tip p15 geninin korunması, p16 gen değişikliklerinin KYSE-30'un onkogenezinde daha kritik bir rol oynadığını ve bu genlerin kanserdeki farklı rollerine odaklanan çalışmalarla ilgili olabileceğini düşündürmektedir.

KYSE-30, atimik çıplak farelere enjekte edildiğinde tümör oluşturma kabiliyetinin gösterdiği gibi tümörijeniktir ve bu da onu ESCC'nin in vivo çalışmaları için mükemmel bir model haline getirmektedir. KYSE-30 hücreleri tarafından oluşturulan tümörlerin histolojik incelemesi, orijinal skuamöz hücreli karsinoma benzer özellikler göstererek hastalığın sadık bir temsilini sağlar. Bu hücre hattı, terapötik veya in vivo uygulamalar için uygun olmasa da, tümör oluşum mekanizmaları, özofagus kanserine yol açan genetik ve epigenetik değişiklikler ve hedefe yönelik tedavilerin geliştirilmesi üzerine yapılan araştırmalar için çok değerlidir.

Doku
Özofagus Skuamöz Epiteli
Hastalık
Özofagus skuamöz hücreli karsinomu
Eş anlamlılar
  • Kyse-30
  • KYSE 30
  • KYSE30
  • Kyse30
  • KYSE0030

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel Benzeri, Uzun Psödopodlu
İki katına çıkma süresi
20 ila 30 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
KYSE-30 (Cytion katalog numarası 305094)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1351

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Lütfen Ham's F12 ve RPMI 1640'ı 50:50 oranında karıştırın (Cytion makale numaraları 820600a ve 820702a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
64 yıl
Etnik köken
Asya