Tartalomra ugrás
KYSE-30
Szövet
A nyelőcső laphámja
Betegség
Nyelőcső laphámsejtes karcinóma
Szinonimák
Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030

Dokumentumok

KYSE-30

Cell line · Termékszám 305094

KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A KYSE-30 egy jól differenciált humán nyelőcső laphámsejtes karcinóma (ESCC) sejtvonal, amely egy felnőtt beteg primer tumorából származik. A KYSE sorozat részeként ezt a sejtvonalat a nyelőcsőrák molekuláris és sejtes jellemzőinek tanulmányozására hozták létre. A KYSE-30 sejtek gyors proliferációjukról nevezetesek, 20,8 órás megduplázódási idejükkel, ami robusztus modellé teszi őket az in vitro rákkutatáshoz. Ezek a sejtek túlnyomórészt adherens monorétegként növekednek, jellegzetes poligonális alakot és egységes megjelenést mutatnak fáziskontrasztos mikroszkópián. Növekedési mintázatuk jellemző az epithelialis eredetű rákos sejtekre, sűrűn tömörített kolóniákat alkotva, amelyek hajlamosak rendezetlen módon egymásra halmozódni, ami tükrözi a tumor invazív jellegét, amelyből származnak.

Genetikai szempontból a KYSE-30 a kulcsfontosságú tumorszupresszor génekben bekövetkezett változások miatt jelentős. A sejtvonal a p16 (INK4a) és a p15 (INK4b) gének vad típusú konfigurációját mutatja, de a p16 génben egy figyelemre méltó pontmutációt hordoz, amely egy korai stop kodont eredményez, ami egy csonka, nem funkcionális fehérjéhez vezet. Ez a mutáció valószínűleg hozzájárul a sejtciklus-szabályozás elvesztéséhez, elősegítve a rákos sejtekre jellemző féktelen proliferációt. A vad típusú p15 gén megtartása azonban arra utal, hogy a p16 génváltozások kritikusabb szerepet játszanak a KYSE-30 onkogenezisében, ami fontos lehet az e gének rákban betöltött eltérő szerepére összpontosító vizsgálatokban.

A KYSE-30 tumorigén, amint azt az atímiás meztelen egerekbe történő befecskendezéskor tumorok kialakítására való képessége bizonyítja, ami kiváló modellé teszi az ESCC in vivo vizsgálatára. A KYSE-30 sejtek által képzett tumorok szövettani vizsgálata az eredeti laphámsejtes karcinómához hasonló jellemzőket mutat, így hűen reprezentálja a betegséget. Ez a sejtvonal felbecsülhetetlen értékű a tumorgenezis mechanizmusainak, a nyelőcsőrákot mozgató genetikai és epigenetikai változásoknak, valamint a célzott terápiák fejlesztésének kutatásához, bár terápiás vagy in vivo alkalmazásra nem alkalmas.

Szövet
A nyelőcső laphámja
Betegség
Nyelőcső laphámsejtes karcinóma
Szinonimák
  • Kyse-30
  • KYSE 30
  • KYSE30
  • Kyse30
  • KYSE0030

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű, hosszú pszeudopoddal
Kettőzési idő
20-30 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
KYSE-30 (Cytion katalógusszám: 305094)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1351

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Keverje össze a Ham's F12-t és az RPMI 1640-et 50:50 arányban (Cytion 820600a és 820702a cikkszámok)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
64 év
Etnikai hovatartozás
Ázsiai