الانتقال إلى المحتوى
KYSE-30
الأنسجة
الظهارة الحرشفية المريئية
المرض
سرطان الخلايا الحرشفية المريئي
المرادفات
Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030

المستندات

KYSE-30

Cell line · رقم المنتج 305094

KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

KYSE-30 هو خط خلوي لسرطان الخلايا الحرشفية المريئية البشري جيد التمايز (ESCC) مشتق من ورم أولي لدى مريض بالغ. وكجزء من سلسلة KYSE، تم إنشاء هذا الخط الخلوي لدراسة الخصائص الجزيئية والخلوية لسرطان المريء. وتتميز خلايا KYSE-30 بتكاثرها السريع، حيث يبلغ زمن تضاعفها 20.8 ساعة، مما يجعلها نموذجاً قوياً لأبحاث السرطان في المختبر. تنمو هذه الخلايا في الغالب كطبقات أحادية ملتصقة، وتُظهر شكلاً مضلعاً مميزاً ومظهراً موحداً تحت الفحص المجهري المتباين الطور. ويُعد نمط نموها نموذجيًا للخلايا السرطانية المشتقة من الخلايا السرطانية الظهارية، حيث تُشكّل مستعمرات متراصة بإحكام مع ميلها إلى التراكم بطريقة غير منظمة، مما يعكس الطبيعة الغازية للورم الذي اشتُقّت منه.

ومن الناحية الوراثية، يُعدّ KYSE-30 مهماً بسبب التغيرات في الجينات الرئيسية المثبطة للورم. يُظهر خط الخلية تكوينًا من النوع البري لجين p16 (INK4a) و p15 (INK4b)، ولكنه يحمل طفرة نقطية ملحوظة في جين p16 ينتج عنها كودون إيقاف سابق لأوانه، مما يؤدي إلى بروتين مبتور وغير وظيفي. وتساهم هذه الطفرة على الأرجح في فقدان التحكم في دورة الخلية، مما يعزز التكاثر غير المقيد الذي يميز الخلايا السرطانية. ومع ذلك، فإن الاحتفاظ بجين p15 من النوع البري يشير إلى أن التغيرات الجينية في جين p16 تلعب دورًا أكثر أهمية في تكوّن الأورام في KYSE-30، وهو ما قد يكون ذا صلة بالدراسات التي تركز على الأدوار التفاضلية لهذه الجينات في السرطان.

يُعد KYSE-30 مولدًا للأورام، كما يتضح من قدرته على تكوين الأورام عند حقنه في فئران عارية غير متجانسة، مما يجعله نموذجًا ممتازًا للدراسات في الجسم الحي لسرطان الخلايا السرطانية في الأورام. يُظهر الفحص النسيجي للأورام التي شكلتها خلايا KYSE-30 خصائص مشابهة لسرطان الخلايا الحرشفية الأصلي، مما يوفر تمثيلاً أميناً للمرض. هذا الخط الخلوي لا يقدر بثمن للبحث في آليات نشأة الورم والتغيرات الجينية والتخلّقية التي تقود سرطان المريء، وتطوير علاجات موجهة، على الرغم من أنه غير مناسب للتطبيقات العلاجية أو في الجسم الحي.

الأنسجة
الظهارة الحرشفية المريئية
المرض
سرطان الخلايا الحرشفية المريئي
المرادفات
  • Kyse-30
  • KYSE 30
  • KYSE30
  • Kyse30
  • KYSE0030

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيهة بالظهارية، ذات طلائية كاذبة طويلة
زمن المضاعفة
من 20 إلى 30 ساعة

04المعرّفات

المرجع
KYSE-30 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305094)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1351

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
يُرجى خلط هام F12 وRPMI 1640 بنسبة 50:50 (رقمي المادة 820600a و820702a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
64 سنة
الأصل العرقي
آسيوي