Перейти до вмісту
KYSE-30
Тканина
Плоский епітелій стравоходу
Хвороба
Плоскоклітинний рак стравоходу
Синоніми
Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030

Документи

KYSE-30

Cell line · Номер товару 305094

KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

KYSE-30 - це добре диференційована клітинна лінія плоскоклітинного раку стравоходу людини, отримана з первинної пухлини дорослого пацієнта. Ця клітинна лінія була створена в рамках серії KYSE для вивчення молекулярних і клітинних характеристик раку стравоходу. Клітини KYSE-30 відрізняються швидкою проліферацією, час подвоєння становить 20,8 годин, що робить їх надійною моделлю для дослідження раку in vitro. Ці клітини ростуть переважно у вигляді адгезійних моношарів, демонструючи характерну полігональну форму і однорідний вигляд при фазово-контрастній мікроскопії. Їх характер росту є типовим для ракових клітин епітеліального походження, утворюючи щільно упаковані колонії з тенденцією до дезорганізованого накопичення, що відображає інвазивний характер пухлини, з якої вони були отримані.

Генетично KYSE-30 відрізняється змінами в ключових генах-супресорах пухлин. Клітинна лінія демонструє дику конфігурацію генів p16 (INK4a) і p15 (INK4b), але несе помітну точкову мутацію в гені p16, яка призводить до передчасної зупинки кодону, що призводить до утворення усіченого, нефункціонального білка. Ця мутація, ймовірно, сприяє втраті контролю над клітинним циклом, сприяючи неконтрольованій проліферації, характерній для ракових клітин. Збереження гена p15 дикого типу, однак, свідчить про те, що зміни гена p16 відіграють більш важливу роль в онкогенезі KYSE-30, що може бути актуальним у дослідженнях, спрямованих на вивчення диференціальної ролі цих генів в онкологічних захворюваннях.

KYSE-30 є туморогенним, що підтверджується його здатністю утворювати пухлини при введенні атимічним голим мишам, що робить його чудовою моделлю для вивчення ЕСКК in vivo. Гістологічне дослідження пухлин, утворених клітинами KYSE-30, показує характеристики, подібні до оригінальної плоскоклітинної карциноми, що забезпечує достовірне представлення захворювання. Ця клітинна лінія є безцінною для дослідження механізмів пухлиноутворення, генетичних та епігенетичних змін, що призводять до розвитку раку стравоходу, а також для розробки таргетної терапії, хоча вона не придатна для терапевтичного або in vivo застосування.

Тканина
Плоский епітелій стравоходу
Хвороба
Плоскоклітинний рак стравоходу
Синоніми
  • Kyse-30
  • KYSE 30
  • KYSE30
  • Kyse30
  • KYSE0030

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліоподібні, з довгим псевдоніжком
Час подвоєння
від 20 до 30 годин

04Ідентифікатори

Посилання
KYSE-30 (каталожний номер Cytion 305094)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1351

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
Будь ласка, змішайте Ham's F12 та RPMI 1640 у співвідношенні 50:50 (артикули 820600a та 820702a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Вік донора
64 роки
Етнічна приналежність
Азійський