Gå direkt till innehållet
KYSE-30
Vävnad
Esofagus skivepitel
Sjukdom
Skivepitelcancer i matstrupen
Synonymer
Kyse-30, KYSE 30, KYSE30, Kyse30, KYSE0030

KYSE-30

Cell line · Produktnummer 305094

KYSE-30 is a well-differentiated human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line derived from a primary tumor in an adult patient. As part of th...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

KYSE-30 är en väldifferentierad human cellinje för skivepitelcancer i matstrupen (ESCC) som härrör från en primärtumör hos en vuxen patient. Som en del av KYSE-serien etablerades denna cellinje för att studera de molekylära och cellulära egenskaperna hos matstrupscancer. KYSE-30-cellerna utmärker sig genom sin snabba proliferation, med en fördubblingstid på 20,8 timmar, vilket gör dem till en robust modell för in vitro-cancerforskning. Dessa celler växer huvudsakligen som vidhäftande monolager och uppvisar en karakteristisk polygonal form och ett enhetligt utseende under faskontrastmikroskopi. Deras tillväxtmönster är typiskt för epiteliala cancerceller och bildar tätt packade kolonier med en tendens att staplas upp på ett oorganiserat sätt, vilket återspeglar den invasiva karaktären hos den tumör som de härrör från.

Genetiskt sett är KYSE-30 signifikant för sina förändringar i viktiga tumörsuppressorgener. Cellinjen uppvisar en vildtypskonfiguration för generna p16 (INK4a) och p15 (INK4b), men den bär på en anmärkningsvärd punktmutation i p16-genen som resulterar i ett för tidigt stoppkodon, vilket leder till ett trunkerat, icke-funktionellt protein. Denna mutation bidrar sannolikt till förlusten av cellcykelkontroll, vilket främjar den okontrollerade proliferation som är karakteristisk för cancerceller. Att p15-genen av vildtyp finns kvar tyder dock på att förändringar i p16-genen spelar en mer kritisk roll i onkogenesen av KYSE-30, vilket kan vara relevant i studier som fokuserar på dessa geners olika roller i cancer.

KYSE-30 är tumörframkallande, vilket framgår av dess förmåga att bilda tumörer när den injiceras i athymiska nakenmöss, vilket gör den till en utmärkt modell för in vivo-studier av ESCC. Den histologiska undersökningen av tumörer som bildats av KYSE-30-celler uppvisar egenskaper som liknar den ursprungliga skivepitelcancerformen, vilket ger en trogen bild av sjukdomen. Denna cellinje är ovärderlig för forskning kring mekanismerna för tumöruppkomst, de genetiska och epigenetiska förändringar som driver esofaguscancer och för utveckling av riktade behandlingar, även om den inte är lämplig för terapeutiska eller in vivo-applikationer.

Vävnad
Esofagus skivepitel
Sjukdom
Skivepitelcancer i matstrupen
Synonymer
  • Kyse-30
  • KYSE 30
  • KYSE30
  • Kyse30
  • KYSE0030

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande, med lång pseudopod
Fördubblingstid
20 till 30 timmar

04Identifierare

Källa
KYSE-30 (Cytion katalognummer 305094)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1351

05Hantering och odling

Odlingsmedium
Blanda Ham's F12 och RPMI 1640 i förhållandet 50:50 (Cytion artikelnummer 820600a och 820702a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
64 år
Etnicitet
Asiat