KYSE-30

KYSE-30 to dobrze zróżnicowana ludzka linia komórkowa raka płaskonabłonkowego przełyku (ESCC) pochodząca z guza pierwotnego u dorosłego pacjenta. Jako część serii KYSE, ta linia komórkowa została utworzona w celu badania molekularnych i komórkowych cech raka przełyku. Komórki KYSE-30 wyróżniają się szybką proliferacją, z czasem podwojenia wynoszącym 20,8 godziny, co czyni je solidnym modelem do badań nad rakiem in vitro. Komórki te rosną głównie jako przylegające monowarstwy, wykazując charakterystyczny wielokątny kształt i jednolity wygląd pod mikroskopem fazowo-kontrastowym. Ich wzór wzrostu jest typowy dla komórek nowotworowych pochodzących z nabłonka, tworząc ciasno upakowane kolonie z tendencją do gromadzenia się w nieuporządkowany sposób, odzwierciedlając inwazyjną naturę guza, z którego pochodzą.

Genetycznie, KYSE-30 jest istotna ze względu na zmiany w kluczowych genach supresorowych nowotworu. Linia komórkowa wykazuje konfigurację typu dzikiego dla genów p16 (INK4a) i p15 (INK4b), ale jest nosicielem znaczącej mutacji punktowej w genie p16, która skutkuje przedwczesnym kodonem stop, prowadząc do skróconego, niefunkcjonalnego białka. Mutacja ta prawdopodobnie przyczynia się do utraty kontroli cyklu komórkowego, promując niekontrolowaną proliferację charakterystyczną dla komórek nowotworowych. Zachowanie genu p15 typu dzikiego sugeruje jednak, że zmiany w genie p16 odgrywają bardziej krytyczną rolę w onkogenezie KYSE-30, co może mieć znaczenie w badaniach skupiających się na zróżnicowanej roli tych genów w nowotworach.

KYSE-30 jest nowotworotwórczy, o czym świadczy jego zdolność do tworzenia guzów po wstrzyknięciu do atymicznych nagich myszy, co czyni go doskonałym modelem do badań in vivo nad ESCC. Badanie histologiczne guzów utworzonych przez komórki KYSE-30 wykazuje cechy podobne do pierwotnego raka płaskonabłonkowego, zapewniając wierne odwzorowanie choroby. Ta linia komórkowa jest nieoceniona w badaniach nad mechanizmami nowotworzenia, zmianami genetycznymi i epigenetycznymi powodującymi raka przełyku oraz rozwojem terapii celowanych, choć nie nadaje się do zastosowań terapeutycznych lub in vivo.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym