Przejdź do treści
KYSE-410
Chusteczka
Przełyk
Choroba
Rak płaskonabłonkowy przełyku
Synonimy
KYSE 410, KYSE410, Kyse410, KYSE0410

Dokumenty

KYSE-410

Cell line · Numer produktu 305122

KYSE-410 is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line that was established from a primary tumor resected from an adult patient. This cel...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

KYSE-410 to ludzka linia komórkowa raka płaskonabłonkowego przełyku (ESCC), która została utworzona z guza pierwotnego wyciętego od dorosłego pacjenta. Ta linia komórkowa jest częścią serii KYSE, która obejmuje wiele modeli ESCC zaprojektowanych w celu zapewnienia kompleksowego narzędzia do badania różnych aspektów raka przełyku. Czas podwojenia komórek KYSE-410 wynosi 24,2 godziny, co odzwierciedla umiarkowaną zdolność proliferacyjną. Rosną jako przylegające monowarstwy, co jest powszechną cechą wśród nabłonkowych komórek nowotworowych i wykazują stosunkowo jednolitą morfologię pod mikroskopem z kontrastem fazowym.

Na poziomie genetycznym KYSE-410 jest szczególnie godny uwagi ze względu na zmiany epigenetyczne. Gen p16 (INK4a) w KYSE-410 wykazuje hipermetylację wysp 5' CpG, co prowadzi do wyciszenia tego kluczowego genu supresorowego nowotworu. Ta zmiana epigenetyczna jest istotnym czynnikiem onkogenezy w wielu nowotworach, w tym ESCC, ponieważ powoduje utratę regulacji cyklu komórkowego i niekontrolowaną proliferację komórek. Pomimo tego, KYSE-410 zachowuje konfigurację typu dzikiego dla genu p15 (INK4b), podkreślając selektywną inaktywację p16, która jest typowa dla niektórych podtypów raka.

Linia komórkowa KYSE-410 jest nowotworotwórcza, o czym świadczy jej zdolność do indukowania powstawania guzów po wszczepieniu do atymicznych myszy nagich. Analiza histologiczna tych guzów wykazuje cechy zgodne z rakiem płaskonabłonkowym, co czyni KYSE-410 odpowiednim modelem do badań in vivo. Ta linia komórkowa jest bardzo cenna dla badań koncentrujących się na zrozumieniu roli modyfikacji epigenetycznych w progresji raka, a także do testowania skuteczności terapii ukierunkowanych na regulatory epigenetyczne, chociaż nie jest przeznaczona do zastosowań terapeutycznych lub in vivo.

Chusteczka
Przełyk
Choroba
Rak płaskonabłonkowy przełyku
Synonimy
  • KYSE 410
  • KYSE410
  • Kyse410
  • KYSE0410

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek
Czas podwojenia
od 32 do 45 godzin

04Identyfikatory

Źródło
KYSE-410 (numer katalogowy Cytion 305122)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1352

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1–3 × 10⁴/cm²
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
51 lat
Pochodzenie etniczne
Azjatycki