Preskoči na vsebino
KYSE-410
Tkivo
Ezofagus
Bolezen
Ploščatocelični karcinom požiralnika
Sinonimi
KYSE 410, KYSE410, Kyse410, KYSE0410

Dokumenti

KYSE-410

Cell line · Številka izdelka 305122

KYSE-410 is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line that was established from a primary tumor resected from an adult patient. This cel...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

KYSE-410 je celična linija človeškega ploščatoceličnega karcinoma požiralnika (ESCC), ki je bila pridobljena iz primarnega tumorja, izrezanega odraslemu bolniku. Ta celična linija je del serije KYSE, ki vključuje več modelov ESCC, zasnovanih kot celovito orodje za preučevanje različnih vidikov raka požiralnika. Čas podvojitve celic KYSE-410 je 24,2 ure, kar kaže na zmerno proliferacijsko sposobnost. Rastejo kot zlepljeni monosloji, kar je skupna značilnost epitelijskih rakavih celic, in imajo razmeroma enotno morfologijo pod fazno kontrastno mikroskopijo.

Na genetski ravni se KYSE-410 odlikuje predvsem po epigenetskih spremembah. Gen p16 (INK4a) v KYSE-410 kaže hipermetilacijo 5' otokov CpG, kar vodi v utišanje tega ključnega tumorskega supresorskega gena. Ta epigenetska sprememba je pomemben dejavnik onkogeneze pri številnih vrstah raka, vključno z ESCC, saj povzroči izgubo regulacije celičnega cikla in nekontrolirano proliferacijo celic. Kljub temu KYSE-410 ohranja konfiguracijo gena p15 (INK4b) divjega tipa, kar kaže na selektivno inaktivacijo gena p16, ki je značilna za nekatere podtipe raka.

Celična linija KYSE-410 je tumorigena, kar dokazuje njena sposobnost, da povzroči nastanek tumorja, ko je implantirana v atimske gole miši. Histološka analiza teh tumorjev kaže značilnosti, ki so skladne s ploščatoceličnim karcinomom, zato je KYSE-410 primeren model za študije in vivo. Ta celična linija je zelo dragocena za raziskave, usmerjene v razumevanje vloge epigenetskih modifikacij pri napredovanju raka, ter za preskušanje učinkovitosti terapij, usmerjenih v epigenetske regulatorje, čeprav ni namenjena terapevtski uporabi ali uporabi in vivo.

Tkivo
Ezofagus
Bolezen
Ploščatocelični karcinom požiralnika
Sinonimi
  • KYSE 410
  • KYSE410
  • Kyse410
  • KYSE0410

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Čas podvojitve
32 do 45 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
KYSE-410 (kataloška številka Cytion 305122)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1352

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
51 let
Etnična pripadnost
Azijski