Preskoči na vsebino
KYSE-150
Tkivo
Ezofagus
Bolezen
Ploščatocelični karcinom požiralnika
Sinonimi
KYSE 150, KYSE150, Kyse150, KY150

Dokumenti

KYSE-150

Cell line · Številka izdelka 305087

The KYSE-150 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor resected from an adult patient. This cell l...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija KYSE-150 je model človeškega ploščatoceličnega karcinoma požiralnika (ESCC), pridobljen iz primarnega tumorja, izrezanega odraslemu bolniku. Ta celična linija je del serije KYSE, ki je bila razvita z namenom zagotoviti zanesljiv in vitro model za preučevanje patobiologije raka požiralnika, zlasti za razumevanje tumorigeneze in terapevtskega odziva. Celice KYSE-150 imajo hiter podvojitveni čas 13,7 ure, kar kaže na visoko proliferacijsko sposobnost, ki je značilna za agresivne fenotipe raka. Te celice rastejo v enoslojni kulturi, se oprijemajo podlage in tvorijo enoten list, kar je značilno za rakave celice epitelijskega izvora.

Genetska analiza KYSE-150 razkriva pomembne spremembe v ključnih tumorskih supresorskih genih, zlasti v genu p16 (INK4a). Ta celična linija kaže aberacije gena p16, zlasti v obliki metilacije otokov CpG, ki utiša gen in prispeva k izgubi regulacije celičnega cikla. Ta epigenetska sprememba je pogost mehanizem pri številnih vrstah raka in poudarja pomen KYSE-150 za preučevanje utišanja genov in njegove vloge pri napredovanju raka. Poleg tega celična linija ohranja konfiguracijo gena p15 divjega tipa, kar kaže na mehanizem selektivne inaktivacije gena p16 namesto gena p15 v tem modelu, kar je lahko zanimivo za primerjalne genomske študije.

KYSE-150 ni dragocen le za preučevanje molekularnih in celičnih mehanizmov ESCC, temveč tudi za raziskovanje učinkov genetskih in epigenetskih sprememb pri raku. Zagotavlja zanesljiv model za preučevanje terapevtskih posegov, ki so usmerjeni na specifične poti, ki so pri ploščatoceličnem karcinomu požiralnika disregulirane. Zaradi visoke stopnje proliferacije in specifičnega genetskega profila je KYSE-150 primeren kandidat za farmakološko testiranje in vitro in druge aplikacije, povezane z raziskavami raka, ne pa za terapevtske namene ali in vivo.

Tkivo
Ezofagus
Bolezen
Ploščatocelični karcinom požiralnika
Sinonimi
  • KYSE 150
  • KYSE150
  • Kyse150
  • KY150

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Čas podvojitve
25 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
KYSE-150 (kataloška številka Cytion 305087)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1348

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
Zmešajte Hamov F12 in RPMI 1640 v razmerju 50:50 (številki izdelkov Cytion 820600a in 820702a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite s 5 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
49 let
Etnična pripadnost
Azijski