Preskoči na vsebino
KYSE180
Tkivo
Ezofagus
Bolezen
Ploščatocelični karcinom
Sinonimi
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

Dokumenti

KYSE180

Cell line · Številka izdelka 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija KYSE180 je model človeškega skvamoznega karcinoma požiralnika (ESCC), pridobljen iz primarnega tumorja. Ta celična linija je uvrščena med zmerno diferencirane in kaže vrsto genetskih sprememb, značilnih za ESCC, vključno z mutacijami v signalni poti NRF2 (NFE2L2). Natančneje, celice KYSE180 nosijo mutacijo NRF2 D77V, ki prispeva k hiperaktivaciji NRF2, transkripcijskega faktorja, vpletenega v odziv na oksidativni stres in napredovanje tumorja.

Celice KYSE180 se pogosto uporabljajo za preučevanje molekularnih mehanizmov ESCC, vključno s kemoresistenco in onkogenim signaliziranjem. Povečana aktivnost NRF2 v celicah KYSE180 je povezana z odpornostjo proti kemoterapiji in radioterapiji, saj NRF2 okrepi celične antioksidativne obrambne mehanizme in presnovne prilagoditve. Nedavne raziskave so identificirale spojine, kot je pirimetamin, ki zavirajo signalizacijo NRF2, kar povzroča zmanjšano proliferacijo in tumorigenost celic KYSE180. Takšne študije poudarjajo terapevtski potencial ciljanega delovanja na NRF2 pri rakih z visoko izraženim NRF2.

Poleg tega so bile celice KYSE180 uporabljene za oceno vloge družine encimov aldo-keto reduktaz (AKR), zlasti AKR1C1 in AKR1C2, pri presnovi zdravil in kemoprevenciji. Ekspresija teh encimov je v celicah KYSE180 povečana, kar povečuje občutljivost na snovi, kot je etil-3,4-dihidroksibenzoat (EDHB). Ta spojina inducira apoptozo in avtofagijo, kar dokazuje uporabnost te celične linije pri raziskovanju odzivov na zdravila in mehanizmov celičnega stresa pri ESCC.

Tkivo
Ezofagus
Bolezen
Ploščatocelični karcinom
Sinonimi
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Stanje MSI
Stabilno (MSS)

04Identifikatorji

Navajanje vira
KYSE180 (kataloška številka Cytion 305450)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1349

05Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij
Mutacija: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), homozigotna

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
2–4 × 10⁴/cm²
Obnova tekočine
2-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
53 let
Etnična pripadnost
Japonski