Mine otse sisu juurde
KYSE180
Kude
Söögitoru
Haigus
Rakk-kartsinoom
Sünonüümid
KYSE 180, KYSE-180, Kyse180, KY180

Dokumendid

KYSE180

Cell line · Toote number 305450

The KYSE180 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. This cell line is classified as moderately ...

€420.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Rakuliin KYSE180 on primaartuumorist saadud inimese söögitoru lamerakulise kartsinoomi (ESCC) mudel. Seda rakuliini liigitatakse mõõdukalt diferentseerituks ning sellel esineb mitmeid ESCC-le iseloomulikke geneetilisi muutusi, sealhulgas mutatsioone NRF2 (NFE2L2) signaalitees. Täpsemalt sisaldavad KYSE180 rakud NRF2 D77V mutatsiooni, mis soodustab NRF2 hüperaktiveerumist – see on transkriptsioonifaktor, mis osaleb oksüdatiivse stressi vastuses ja kasvaja progresseerumises.

KYSE180-rakke kasutatakse laialdaselt ESCC molekulaarsete mehhanismide uurimiseks, sealhulgas kemoresistentsuse ja onkogeense signaalimise uurimiseks. KYSE180-rakkudes täheldatud kõrgenenud NRF2 aktiivsust on seostatud resistentsusega kemoteraapia ja kiiritusravi suhtes, kuna NRF2 tugevdab rakkude antioksüdantset kaitset ja ainevahetuse kohanemist. Hiljutised uuringud on tuvastanud ühendeid, nagu pürimetamiin, mis pärsivad NRF2 signaalimist, mille tulemusena väheneb KYSE180 rakkude proliferatsioon ja tuumorigeensus. Sellised uuringud rõhutavad NRF2-le suunatud ravi potentsiaali NRF2-rikkastes vähivormides.

Lisaks on KYSE180 rakke kasutatud aldo-ketoreduktaasi (AKR) ensüümide perekonna, eriti AKR1C1 ja AKR1C2 rolli hindamiseks ravimite metabolismis ja kemopreventsioonis. Nende ensüümide ekspressioon on KYSE180-rakkudes ülesreguleeritud, mis suurendab tundlikkust selliste ainete suhtes nagu etüül-3,4-dihüdroksübensoaat (EDHB). See ühend indutseerib apoptoosi ja autofaagiat, mis näitab selle rakuliini kasulikkust ravimireaktsioonide ja rakuliste stressimehhanismide uurimisel söögitoru kartsinoomis (ESCC).

Kude
Söögitoru
Haigus
Rakk-kartsinoom
Sünonüümid
  • KYSE 180
  • KYSE-180
  • Kyse180
  • KY180

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
MSI staatus
Stabiilne (MSS)

04Tunnused

Viide
KYSE180 (Cytioni katalooginumber 305450)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1349

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TP53, p.Ile195Thr (c.584T>C), homosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2–4 × 10⁴/cm²
Vedeliku vahetus
2 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
53 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani