Mine otse sisu juurde
KYSE-410
Kude
Söögitoru
Haigus
Söögitoru laikerkartsinoom
Sünonüümid
KYSE 410, KYSE410, Kyse410, KYSE0410

Dokumendid

KYSE-410

Cell line · Toote number 305122

KYSE-410 is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line that was established from a primary tumor resected from an adult patient. This cel...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KYSE-410 on inimese söögitoru lamerakk-kartsinoomi (ESCC) rakuliin, mis on loodud täiskasvanud patsiendilt resekteeritud primaarsest kasvajast. See rakuliin on osa KYSE-seeriast, mis sisaldab mitmeid ESCC mudeleid, mis on loodud terviklikuks vahendiks söögitoruvähi erinevate aspektide uurimiseks. KYSE-410 rakkude kahekordistumisaeg on 24,2 tundi, mis näitab mõõdukat proliferatsioonivõimet. Nad kasvavad adherentsete monokihidena, mis on epiteelist pärinevate vähirakkude ühine tunnusjoon, ja neil on faasikontrastmikroskoopias suhteliselt ühtlane morfoloogia.

Geneetilisel tasandil on KYSE-410 eriti tähelepanuväärne oma epigeneetiliste muutuste poolest. KYSE-410 geenil p16 (INK4a) esineb 5' CpG-saarte hüpermetülatsioon, mis viib selle olulise kasvajasupressorgeeni vaigistamiseni. See epigeneetiline muutus on paljude vähivormide, sealhulgas ESCC puhul oluline onkogeneesi põhjustaja, sest selle tulemuseks on rakutsükli regulatsiooni kadumine ja rakkude kontrollimatu proliferatsioon. Sellele vaatamata säilitab KYSE-410 p15 (INK4b) geeni metsikut tüüpi konfiguratsiooni, rõhutades p16 selektiivset inaktiveerimist, mis on tüüpiline teatavatele vähi alatüüpidele.

KYSE-410 rakuliin on tuumorigeenne, mida näitab selle võime indutseerida tuumori teket, kui see implanteeritakse atüümsetele alasti hiirtele. Nende kasvajate histoloogiline analüüs näitab, et need on plaatinakartsinoomi tunnused, mistõttu KYSE-410 on asjakohane mudel in vivo uuringuteks. See rakuliin on väga väärtuslik uuringutes, mis keskenduvad epigeneetiliste modifikatsioonide rolli mõistmisele vähi progresseerumises, samuti epigeneetiliste regulaatorite vastu suunatud ravimeetodite tõhususe testimiseks, kuigi see ei ole ette nähtud terapeutilisteks või in vivo rakendusteks.

Kude
Söögitoru
Haigus
Söögitoru laikerkartsinoom
Sünonüümid
  • KYSE 410
  • KYSE410
  • Kyse410
  • KYSE0410

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Kahekordistumisaeg
32 kuni 45 tundi

04Tunnused

Viide
KYSE-410 (Cytion katalooginumber 305122)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1352

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1–3 × 10⁴/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
51 aastat
Etniline kuuluvus
Aasia