Siirry sisältöön
KYSE-410
Kudos
Ruokatorvi
Sairaus
Ruokatorven okasolusyöpä
Synonyymit
KYSE 410, KYSE410, Kyse410, KYSE0410

Asiakirjat

KYSE-410

Cell line · Tuotenumero 305122

KYSE-410 is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) cell line that was established from a primary tumor resected from an adult patient. This cel...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

KYSE-410 on ihmisen ruokatorven levyepiteelisolusyöpä (ESCC), joka perustettiin aikuispotilaalta leikatusta primaarikasvaimesta. Tämä solulinja on osa KYSE-sarjaa, joka sisältää useita ESCC-malleja, jotka on suunniteltu tarjoamaan kattava väline ruokatorven syövän eri näkökohtien tutkimiseen. KYSE-410-solujen kaksinkertaistumisaika on 24,2 tuntia, mikä kuvastaa kohtalaista proliferatiivista kapasiteettia. Ne kasvavat tarttuvina monokerroksina, mikä on yleinen piirre epiteeliperäisten syöpäsolujen keskuudessa, ja niillä on suhteellisen yhtenäinen morfologia vaihekontrastimikroskopiassa.

Geneettisellä tasolla KYSE-410 on erityisen merkittävä epigeneettisten muutostensa vuoksi. KYSE-410:n p16-geenin (INK4a) 5' CpG-saarekkeiden hypermetyloituminen johtaa tämän tärkeän kasvainsuppressorigeenin vaimentumiseen. Tämä epigeneettinen muutos on merkittävä onkogeneesin aiheuttaja monissa syövissä, myös ESCC:ssä, sillä se johtaa solusyklin säätelyn katoamiseen ja hillitsemättömään solujen lisääntymiseen. Tästä huolimatta KYSE-410 säilyttää p15-geenin (INK4b) villin tyypin konfiguraation, mikä korostaa p16:n valikoivaa inaktivoitumista, joka on tyypillistä tietyille syövän alatyypeille.

KYSE-410-solulinja on tumorigeeninen, kuten sen kyky indusoida kasvaimen muodostumista, kun se istutetaan atyymisiin alasti eläviin hiiriin, osoittaa. Näiden kasvainten histologinen analyysi osoittaa levyepiteelisolusyövän piirteitä, mikä tekee KYSE-410:stä relevantin mallin in vivo -tutkimuksiin. Tämä solulinja on erittäin arvokas tutkimuksessa, jossa keskitytään ymmärtämään epigeneettisten modifikaatioiden merkitystä syövän etenemisessä, sekä epigeneettisiin säätelijöihin kohdistuvien hoitojen tehokkuuden testaamisessa, vaikka sitä ei olekaan tarkoitettu terapeuttisiin tai in vivo -sovelluksiin.

Kudos
Ruokatorvi
Sairaus
Ruokatorven okasolusyöpä
Synonyymit
  • KYSE 410
  • KYSE410
  • Kyse410
  • KYSE0410

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kaksinkertaistumisaika
32-45 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
KYSE-410 (Cytionin tuotenumero 305122)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1352

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
51 vuotta
Etnisyys
Aasialainen