KYSE-30

KYSE-30 on hyvin erilaistunut ihmisen ruokatorven levyepiteelisolusyöpä (ESCC), joka on peräisin aikuispotilaan primaarikasvaimesta. Tämä solulinja on osa KYSE-sarjaa, ja se perustettiin ruokatorven syövän molekyyli- ja soluominaisuuksien tutkimiseksi. KYSE-30-solut ovat huomattavan nopeasti lisääntyviä, ja niiden kaksinkertaistumisaika on 20,8 tuntia, mikä tekee niistä vankan mallin in vitro -syöpätutkimukseen. Nämä solut kasvavat pääasiassa adherenttisina monokerroksina, joilla on tyypillinen monikulmion muoto ja yhtenäinen ulkonäkö vaihekontrastimikroskopiassa. Niiden kasvumalli on tyypillinen epiteelisoluista peräisin oleville syöpäsoluille, ja ne muodostavat tiiviisti pakkautuneita pesäkkeitä, joilla on taipumus kasautua epäjärjestyksessä, mikä kuvastaa sen kasvaimen invasiivista luonnetta, josta ne ovat peräisin.

Geneettisesti KYSE-30 on merkittävä, koska siinä on muutoksia keskeisissä kasvainsuppressorigeeneissä. Solulinjalla on p16- (INK4a) ja p15- (INK4b) geenien villityyppinen konfiguraatio, mutta siinä on huomattava pistemutaatio p16-geenissä, joka johtaa ennenaikaiseen stop-kodoniin, joka johtaa typistettyyn, toimimattomaan proteiiniin. Tämä mutaatio vaikuttaa todennäköisesti solusyklin hallinnan menettämiseen, mikä edistää syöpäsoluille ominaista hallitsematonta lisääntymistä. Villiintyneen p15-geenin säilyminen viittaa kuitenkin siihen, että p16-geenin muutoksilla on kriittisempi rooli KYSE-30:n onkogeneesissä, mikä voi olla merkityksellistä tutkimuksissa, joissa keskitytään näiden geenien erilaisiin rooleihin syövässä.

KYSE-30 on tumorigeeninen, kuten sen kyky muodostaa kasvaimia, kun se ruiskutetaan atyymisiin nude-hiiriin, mikä tekee siitä erinomaisen mallin ESCC:n in vivo -tutkimuksiin. KYSE-30-solujen muodostamien kasvainten histologinen tutkimus osoittaa samanlaisia piirteitä kuin alkuperäisessä levyepiteelisolusyövässä, mikä antaa uskollisen kuvan taudista. Tämä solulinja on korvaamaton kasvainten syntymekanismien, ruokatorven syöpää aiheuttavien geneettisten ja epigeneettisten muutosten sekä kohdennettujen hoitojen kehittämisen tutkimuksessa, vaikka se ei sovellukaan terapeuttisiin tai in vivo -sovelluksiin.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa