KYSE-30

KYSE-30 er en veldifferensiert human cellelinje for øsofagus plateepitelkarsinom (ESCC) som stammer fra en primærsvulst hos en voksen pasient. Som en del av KYSE-serien ble denne cellelinjen etablert for å studere de molekylære og cellulære egenskapene til spiserørskreft. KYSE-30-celler kjennetegnes av rask spredning, med en fordoblingstid på 20,8 timer, noe som gjør dem til en robust modell for in vitro-kreftforskning. Disse cellene vokser hovedsakelig som adherente monolag, og de har en karakteristisk polygonal form og et ensartet utseende under fasekontrastmikroskopi. Vekstmønsteret er typisk for epiteliale kreftceller, og de danner tettpakkede kolonier med en tendens til å hope seg opp på en uorganisert måte, noe som gjenspeiler den invasive naturen til svulsten de stammer fra.

Genetisk sett er KYSE-30 karakterisert av endringer i viktige tumorsuppressorgener. Cellelinjen har en villtypekonfigurasjon for p16 (INK4a)- og p15 (INK4b)-genene, men den har en bemerkelsesverdig punktmutasjon i p16-genet som resulterer i et prematurt stoppkodon, noe som fører til et avkortet, ikke-funksjonelt protein. Denne mutasjonen bidrar sannsynligvis til tap av cellesykluskontroll, noe som fremmer den ukontrollerte proliferasjonen som er karakteristisk for kreftceller. Det at p15-genet av villtype er bevart, tyder imidlertid på at endringer i p16-genet spiller en mer kritisk rolle i onkogenesen av KYSE-30, noe som kan være relevant i studier som fokuserer på de ulike rollene disse genene har i kreft.

KYSE-30 er tumorgenetisk, noe som demonstreres av dens evne til å danne svulster når den injiseres i athymiske nakenmus, noe som gjør den til en utmerket modell for in vivo-studier av ESCC. Histologisk undersøkelse av svulster dannet av KYSE-30-celler viser egenskaper som ligner på det opprinnelige plateepitelkarsinomet, noe som gir en tro gjengivelse av sykdommen. Denne cellelinjen er uvurderlig for forskning på mekanismene bak svulstdannelse, de genetiske og epigenetiske endringene som ligger til grunn for spiserørskreft, og for utvikling av målrettede terapier, selv om den ikke egner seg for terapeutiske eller in vivo-anvendelser.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring