KYSE-30

KYSE-30 е добре диференцирана човешка клетъчна линия на плоскоклетъчен карцином на хранопровода (ESCC), получена от първичен тумор на възрастен пациент. Като част от серията KYSE, тази клетъчна линия е създадена за изследване на молекулярните и клетъчните характеристики на рака на хранопровода. Клетките KYSE-30 се отличават с бърза пролиферация, като времето за удвояване е 20,8 часа, което ги прави надежден модел за in vitro изследвания на рака. Тези клетки растат предимно като адхерентни монослоеве, като показват характерна многоъгълна форма и равномерен вид при фазово-контрастна микроскопия. Моделът им на растеж е типичен за раковите клетки, получени от епител, като образуват плътно подредени колонии с тенденция да се натрупват по неорганизиран начин, което отразява инвазивния характер на тумора, от който са получени.

От генетична гледна точка KYSE-30 е значим с измененията си в ключови туморсупресорни гени. Клетъчната линия показва конфигурация на див тип за гените p16 (INK4a) и p15 (INK4b), но носи забележителна точкова мутация в гена p16, която води до преждевременен стоп кодон, водещ до съкратен, нефункционален протеин. Тази мутация вероятно допринася за загубата на контрол на клетъчния цикъл, като насърчава неконтролируемото размножаване, характерно за раковите клетки. Запазването на дивия тип на гена p15 обаче предполага, че промените в гена p16 играят по-критична роля в онкогенезата на KYSE-30, което може да е от значение при проучвания, фокусирани върху диференциалните роли на тези гени при рака.

KYSE-30 е туморогенен, както се вижда от способността му да образува тумори при инжектиране в атимни голи мишки, което го прави отличен модел за in vivo изследвания на ESCC. Хистологичното изследване на туморите, образувани от клетките на KYSE-30, показва характеристики, подобни на оригиналния плоскоклетъчен карцином, което осигурява вярно представяне на заболяването. Тази клетъчна линия е безценна за изследване на механизмите на туморогенезата, генетичните и епигенетичните промени, обуславящи рака на хранопровода, и за разработване на целеви терапии, въпреки че не е подходяща за терапевтични или in vivo приложения.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация