Премини към съдържанието
KYSE520
Тъкан
Езофагус
Заболяване
Плоскоклетъчен карцином
Синоними
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Документи

KYSE520

Cell line · Номер на продукта 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия KYSE520 е модел на човешки езофагеален плоскоклетъчен карцином (ESCC), получен от първичен тумор. Тя е умерено диференцирана и е от съществено значение за изследване на епително-мезенхимната пластичност (ЕМП) при рак на хранопровода. Клетките KYSE520 показват хетерогенност, състояща се от епителиални (CD44v+) и мезенхимни (CD44v-) субпопулации. Тези две популации са способни да се преобразуват, което отразява динамичния процес на ЕМП. Това свойство превръща KYSE520 в отличен модел за изучаване на характеристиките на раковите стволови клетки и механизмите на химиорезистентност при ESCC.

От генетична гледна точка клетките KYSE520 показват забележителна епигенетична регулация. Промоторната област на гена JAM3, туморен супресор, е неметилирана в тези клетки, което позволява неговата експресия. JAM3 играе роля в регулирането на клетъчната пролиферация, миграция и инвазия чрез Wnt/β-катенин сигнализацията. Поддържането на експресията на JAM3 в KYSE520 е свързано с потискането на агресивните ракови фенотипове.

В терапевтичните изследвания клетките KYSE520 са използвани за изследване на ролята на рецептора за фибробластен растежен фактор, подобен на 1 (FGFRL1). Проучванията показват, че при FGFRL1-дефицитните клетки KYSE520 се наблюдава намален туморен растеж и подвижност, заедно с намаляване на експресията на матрична металопротеиназа-1 (MMP-1) и свързващ протеин на фибробластния растежен фактор 1 (FGFBP1). Тези открития подчертават значението на FGFRL1 в туморогенезата и предлагат потенциални терапевтични цели. Освен това динамиката на ЕМП и свързаните с нея молекулярни пътища в клетките на KYSE520 дават представа за прогресията на ESCC и механизмите на резистентност, като допринасят за разработването на целеви лечения.

Тъкан
Езофагус
Заболяване
Плоскоклетъчен карцином
Синоними
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител

04Идентификатори

Източник
KYSE520 (каталожен номер 305449 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1355

05Проява и предразположеност

Онкогени
TP53, MYC
Мутационен профил
Мутация: TP53, c.376-2A>T, акцепторна мутация

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
Ham's F12, w: 1,0 mM стабилен глутамин, w: 1,0 mM натриев пируват, w: 1,1 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820600a) + RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820700a); смес 1:1
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 2% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
0,6 - 1,2 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
58 години
Етническа принадлежност
Японски