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KYSE520
Tissu
Œsophage
Maladie
Carcinome épidermoïde
Synonymes
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

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KYSE520

Cell line · Référence du produit 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire KYSE520 est un modèle humain de carcinome épidermoïde de l'œsophage (ESCC) dérivé d'une tumeur primaire. Elle est modérément différenciée et a permis d'étudier la plasticité épithéliale-mésenchymateuse (EMP) dans le cancer de l'œsophage. Les cellules KYSE520 présentent une hétérogénéité, composée de sous-populations de type épithélial (CD44v+) et de type mésenchymateux (CD44v-). Ces deux populations sont capables de s'interconvertir, ce qui reflète un processus dynamique d'EMP. Cette propriété fait de KYSE520 un excellent modèle pour l'étude des caractéristiques des cellules souches cancéreuses et des mécanismes de chimiorésistance dans l'ESCC.

D'un point de vue génétique, les cellules KYSE520 présentent une régulation épigénétique notable. La région promotrice du gène JAM3, un suppresseur de tumeur, n'est pas méthylée dans ces cellules, ce qui permet son expression. JAM3 joue un rôle dans la régulation de la prolifération, de la migration et de l'invasion cellulaires par le biais de la signalisation Wnt/β-caténine. Le maintien de l'expression de JAM3 dans KYSE520 a été lié à la suppression des phénotypes cancéreux agressifs.

Dans le cadre de la recherche thérapeutique, les cellules KYSE520 ont été utilisées pour explorer le rôle du récepteur de type 1 du facteur de croissance des fibroblastes (FGFRL1). Des études ont montré que les cellules KYSE520 déficientes en FGFRL1 présentent une croissance et une motilité tumorales réduites, ainsi qu'une diminution de l'expression de la métalloprotéinase matricielle 1 (MMP-1) et de la protéine de liaison du facteur de croissance des fibroblastes 1 (FGFBP1). Ces résultats soulignent l'importance de FGFRL1 dans la tumorigenèse et suggèrent des cibles thérapeutiques potentielles. En outre, la dynamique EMP et les voies moléculaires associées dans les cellules KYSE520 permettent de mieux comprendre la progression de l'ESCC et les mécanismes de résistance, contribuant ainsi au développement de traitements ciblés.

Tissu
Œsophage
Maladie
Carcinome épidermoïde
Synonymes
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial

04Identifiants

Référence
KYSE520 (numéro de catalogue Cytion 305449)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Expression et sensibilité

Oncogènes
TP53, MYC
Profil mutationnel
Mutation : TP53, c.376-2A>T, mutation de l'accepteur d'épissage

06Manipulation et culture

Milieu de culture
Ham's F12, w : 1.0 mM Glutamine stable, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium, w : 1.1 g/L NaHCO3 (Cytion numéro d'article 820600a) + RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion numéro d'article 820700a) ; mélange 1:1
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 2% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
0,6 - 1,2 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
58 ans
Origine ethnique
Japonais