Μετάβαση στο περιεχόμενο
KYSE520
Ιστός
Οισοφάγος
Ασθένεια
Καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων
Συνώνυμα
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Έγγραφα

KYSE520

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά KYSE520 είναι ένα ανθρώπινο μοντέλο πλακώδους καρκινώματος του οισοφάγου (ESCC) που προέρχεται από πρωτογενή όγκο. Είναι μέτρια διαφοροποιημένη και έχει συμβάλει καθοριστικά στη διερεύνηση της επιθηλιακής-μεσεγχυματικής πλαστικότητας (EMP) στον καρκίνο του οισοφάγου. Τα κύτταρα KYSE520 παρουσιάζουν ετερογένεια, αποτελούμενα τόσο από υποπληθυσμούς που μοιάζουν με επιθήλιο (CD44v+) όσο και από υποπληθυσμούς που μοιάζουν με μεσέγχυμα (CD44v-). Αυτοί οι δύο πληθυσμοί είναι ικανοί να μετασχηματίζονται μεταξύ τους, αντανακλώντας μια δυναμική διαδικασία EMP. Η ιδιότητα αυτή καθιστά το KYSE520 ένα εξαιρετικό μοντέλο για τη μελέτη των χαρακτηριστικών των καρκινικών βλαστικών κυττάρων και των μηχανισμών χημειοαντοχής στο ESCC.

Γενετικά, τα κύτταρα KYSE520 εμφανίζουν αξιοσημείωτη επιγενετική ρύθμιση. Η περιοχή υποκινητή του γονιδίου JAM3, ενός ογκοκατασταλτικού παράγοντα, δεν έχει μεθυλιωθεί σε αυτά τα κύτταρα, επιτρέποντας την έκφρασή του. Το JAM3 διαδραματίζει ρόλο στη ρύθμιση του κυτταρικού πολλαπλασιασμού, της μετανάστευσης και της εισβολής μέσω της σηματοδότησης Wnt/β-κατενίνης. Η διατήρηση της έκφρασης του JAM3 στο KYSE520 έχει συνδεθεί με την καταστολή των επιθετικών καρκινικών φαινοτύπων.

Στη θεραπευτική έρευνα, τα κύτταρα KYSE520 έχουν χρησιμοποιηθεί για τη διερεύνηση του ρόλου του υποδοχέα που μοιάζει με τον αυξητικό παράγοντα ινοβλαστών 1 (FGFRL1). Μελέτες έχουν δείξει ότι κύτταρα KYSE520 με ανεπάρκεια FGFRL1 παρουσιάζουν μειωμένη ανάπτυξη και κινητικότητα όγκου, παράλληλα με μείωση της έκφρασης της μεταλλοπρωτεϊνάσης της μήτρας-1 (MMP-1) και της πρωτεΐνης δέσμευσης του αυξητικού παράγοντα ινοβλαστών 1 (FGFBP1). Τα ευρήματα αυτά υπογραμμίζουν τη σημασία του FGFRL1 στην καρκινογένεση και υποδεικνύουν πιθανούς θεραπευτικούς στόχους. Επιπλέον, η δυναμική του EMP και τα συναφή μοριακά μονοπάτια στα κύτταρα KYSE520 παρέχουν πληροφορίες σχετικά με την εξέλιξη του ESCC και τους μηχανισμούς αντίστασης, συμβάλλοντας στην ανάπτυξη στοχευμένων θεραπειών.

Ιστός
Οισοφάγος
Ασθένεια
Καρκίνωμα πλακωδών κυττάρων
Συνώνυμα
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
KYSE520 (αριθμός καταλόγου Cytion 305449)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1355

05Έκφραση και ευαισθησία

Ογκογονίδια
TP53, MYC
Προφίλ μεταλλάξεων
Μετάλλαξη: 376-2A>T, μετάλλαξη του αποδέκτη σύνδεσης

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
Ham's F12, w: 1,0 mM σταθερή γλουταμίνη, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,1 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820600a) + RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερή γλουταμίνη, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a); μείγμα 1:1
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 2% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
0,6 - 1,2 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
58 χρόνια
Εθνικότητα
Ιαπωνικά