Ga naar de inhoud
KYSE520
Weefsel
Slokdarm
Ziekte
Plaveiselcelcarcinoom
Synoniemen
KYSE 520, KYSE-520, Kyse520, KYSE0520

Documenten

KYSE520

Cell line · Productnummer 305449

The KYSE520 cell line is a human esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) model derived from a primary tumor. It is moderately differentiated and has bee...

€550.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De KYSE520 cellijn is een humaan oesofageaal plaveiselcelcarcinoom (ESCC) model afgeleid van een primaire tumor. De lijn is matig gedifferentieerd en heeft een belangrijke rol gespeeld bij het onderzoek naar epitheliale-mesenchymale plasticiteit (EMP) in slokdarmkanker. KYSE520 cellen vertonen heterogeniteit, bestaande uit zowel epitheliale (CD44v+) als mesenchymale (CD44v-) subpopulaties. Deze twee populaties zijn in staat tot interconversie, wat een dynamisch EMP-proces weerspiegelt. Deze eigenschap maakt KYSE520 een uitstekend model voor het bestuderen van kankerstamcelkenmerken en chemoresistentiemechanismen in ESCC.

Genetisch gezien vertonen KYSE520 cellen opmerkelijke epigenetische regulatie. De promotorregio van het JAM3-gen, een tumorsuppressor, is ongemethyleerd in deze cellen, waardoor het tot expressie kan komen. JAM3 speelt een rol bij het reguleren van celproliferatie, migratie en invasie via Wnt/β-catenine signalering. Het behoud van JAM3 expressie in KYSE520 is gekoppeld aan de onderdrukking van agressieve kankerfenotypes.

In therapeutisch onderzoek zijn KYSE520 cellen gebruikt om de rol van fibroblast groeifactor receptor-like 1 (FGFRL1) te onderzoeken. Studies hebben aangetoond dat FGFRL1-deficiënte KYSE520 cellen een verminderde tumorgroei en motiliteit vertonen, naast een afname in matrix metalloproteïnase-1 (MMP-1) en fibroblast growth factor binding protein 1 (FGFBP1) expressie. Deze bevindingen onderstrepen het belang van FGFRL1 in tumorigenese en suggereren potentiële therapeutische doelen. Daarnaast bieden de EMP-dynamiek en geassocieerde moleculaire routes in KYSE520-cellen inzicht in ESCC-progressie en resistentiemechanismen, wat bijdraagt aan de ontwikkeling van gerichte behandelingen.

Weefsel
Slokdarm
Ziekte
Plaveiselcelcarcinoom
Synoniemen
  • KYSE 520
  • KYSE-520
  • Kyse520
  • KYSE0520

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
KYSE520 (Cytion catalogusnummer 305449)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1355

05Expressie en vatbaarheid

Oncogenen
TP53, MYC
Mutatieprofiel
Mutatie: TP53, c.376-2A>T, Splice acceptor mutatie

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiele Glutamine, w: 1,0 mM natriumpyruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a) + RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a); 1:1 mengsel
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 2% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
0,6 - 1,2 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
58 jaar
Etnische afkomst
Japans